中药多糖的分子量及结构研究进展

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1、中药多糖的分子量及结构研究进展【摘要】  目前中药多糖药理作用研究比较活跃,而其分子量和分子量分布及化学结构确定成为进一步深入研究多糖特异性和构效关系以及药效机理的基础。该文归纳总结了多糖分子量和分子量分布及化学结构研究的方法。【关键词】中药多糖;分子量;分子量分布;化学结构;生物活性  Abstract:ThestudyonpharmacologicalactionofpolysaccharideoftraditionalChinesedrugismoreactiveatpresent,butthedefinitionofmolecul

2、arolecularicalconstitutionhasbeethefoundationofbetterstudyonspecificityandstructure-functionrelationshipanddrugactionmechanismofpolysaccharide.Themethodsofstudyonmolecularolecularicalconstitutuionofpolysaccharideicalconstitution;Biologicalactivity  多糖通常是由几百甚至几千个单糖组成的高分子均聚

3、物或共聚物,其能被水解为多个单糖。多糖存在于植物和动物之中,在高等植物和藻类中,它们是细胞壁或细胞内部的组分;在细菌和真菌中,它们可能既是细胞组分,又是新陈代谢的产物。多糖分子量很大,其性质也大大不同于单糖和低聚糖。现代研究发现茯苓、黄芪、猪苓、枸杞、柴胡、人参、香菇、云芝、银耳、灵芝、冬虫夏草等中药其生物活性成分之一是多糖,具有免疫调节、抗辐射、抗凝血、降血糖、降血脂等功效,而它们的生理活性与多糖分子量和分子量分布及化学结构有密切关系。  1中药多糖分子量和分子量分布研究中药多糖是生物大分子,属高分子化合物,其分子量的测定方法有绝对法、

4、当量法和相对法。表示其分子量大小的方式有重均分子量(Mm×30.0cm),示差折光检测器,分析测定了13批样品,得到四维灵芝液中多糖组分高效凝胶色谱图谱、多糖组分平均分子量。郭辉〔6〕采用色谱OHPakSB-805HQ(8mm×300mm),示差折光器检测器,测得红毛五加多糖各组分的重均分子量。姜素琴〔7〕采用色谱柱为TSK-GELG3000PR)  核磁共振光谱主要解决多糖结构中糖苷键的构型和重复结构中单糖的数目。1H核磁共振波谱主要解决多糖结构中糖苷键的构型,13MR化学位移范围宽广,信号清晰,在多糖结构分析中可确认各种碳核以及分辨分

5、子的构型和构象。13MR可用来确定多糖残基中取代位置和分枝点〔13〕,而2DNMR对于多糖13MR谱全归属起着至关重要的作用〔14〕。白日霞等〔15〕利用C13核磁共振手段表征了mg级小皮伞多糖结构。李熙灿等〔16〕应用1H-NMR,13MR对黑海参中的多糖成分进行了结构鉴定。核磁共振技术对多糖结构的测定非常重要,如果再与糖组分分析〔17〕等技术相结合,将更有助于多糖结构的确定。  2.1.3质谱和气-质联  用质谱在多糖的结构研究中是一种重要的手段,包括电子轰击质谱、化学电离质谱、快原子轰击质谱、电喷雾质谱、串联质谱等〔18〕。其中化学

6、电离质谱(CI)能提供可靠的分子量,糖碎片的性质,还原糖和非还原端糖的情况等,气-质联用可大大简化糖的结构分析工作。白日霞〔19〕应用气相色谱-质谱法对甲基化多糖的测定方法及通过质谱解析对多糖的一级结构的推测原理进行了研究。张宏等〔20〕经气质联机(GC一MS)分析,初步确定了淫羊藿多糖结构糖苷的键型,并推测出其可能的结构。Ulrike经气质联机(GC一MS)分析snoold蘑菇多糖,确定其为β-(1→4)糖苷键葡聚糖〔21〕。  2.2多糖高级结构测定常用方法  多糖高级结构分析中常应用X射线衍射法(XRD)、毛细管电泳法(CE)、核

7、磁共振法(NMR),旋光度(ORD)和圆二色谱(CD)、快原子轰击质谱(FAB一MS)、气质联用(GC一MS)、原子力显微镜(AFM)等检测手段。X-射线衍射法主要用来测定多糖的晶体结构,王书军等〔22〕应用X-射线衍射法测定三种贝母多糖的晶体结构类型为B-型。圆二色谱常用来研究多糖的构型和构象,张丽萍等〔23〕利用圆二色谱测定了金顶侧耳多糖及其化学修饰产物水溶液的构象。原子力显微镜可以在空气和液体中对多糖分子的单分子和聚集体成像,得到单分子的直径、长度等量化信息和分子聚集体形貌特征〔24〕。  中药多糖的生物活性不仅与一级结构有关,而且

8、与其高级结构关系密切。杨典洱等〔25〕研究发现脱乙酰壳多糖抑制真菌生长的能力与其分子量和化学结构紧密相关,脱乙酞壳多糖分子量越小,分子中的自由氨基越多,抑制真菌的活性越大。X-衍射分析表明,具

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