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1、工艺技术丝素蛋白的制备与脱盐研究田三德，解尚云，潘婕(陕西科技大学生命科学与工程学院,咸阳712081)摘要:以蚕丝为原料,脱胶后,用Na2CO3溶液精炼两次,然后选用适宜浓度的CaCl2溶解丝素,并将所得溶液采用透析袋活水脱盐,经冷冻干燥后进行结果分析。实验所确定丝素蛋白制备的最佳工艺条件为脱胶精炼最佳浴比1∶50、最佳脱胶时间为30min、CaCl2溶解丝素时最适浓度为40%、浴比1∶10。关键词：丝素蛋白;脱盐;透析;氨基酸中图分类号：TS201.1文献标识码：A文章编号：1005-9989(2007)01-0117-04Researchonthep
2、reparationanddesaltingofsilkfibroinTIANSan-de,XIEShang-yun,PANJie(CollegeofLifeScienceandEngineering,ShaanxiUniversityofScienceandTechnology,Xianyang712081)Abstract:Thispaperusessilkasmaterial,silkisrefinedinNa2CO3solutiontwiceafterdoffingsericin.Youcangetsilkfibroinandthendissolv
3、essilkfibroinbytheoptimumconcentrationCaCl2solution.Theobtainedsolu-tionisthendesaltedbythedialysisbag,frozenintodrynessandanalyzedtheresult.Thebestconditionsoftheprocessesensuredbytheexperimentareasfollows:thebestofsilkratiotosolutionis1∶50,thebestdesaltingtimeis30min,thebestconc
4、entrationofCaCl2solutionis40%,thebestratioofsilktosolutionis1∶10.Keywords:silkfibroin;desalting;dialysis;aminoacid丝素不仅是重要的纺织原料,而且经过适宜的1材料与仪器工艺条件可开发制备成食品﹑药用的高价值材料,其良好的成膜性及其应用潜能在国内外已成为最受蚕丝、透析袋:市售;人们关注的探索热点之一。蚕丝的主要成分是丝素Na2CO3、CaCl2、NaHCO3、EDTA、苦味酸、胭脂蛋白。丝素蛋白由分子量约5万的小肽链和分子量为红:分析纯;约30万的
5、大肽链组成,丝素蛋白的结晶部分为较为DK-98型电子恒温水浴锅:余兆市东方电子仪紧密的β-折叠结构[1]器厂;LYO-1型冷冻干燥机:Tofflon有限公司;。与传统的的应用较多的天然高分子材料——壳聚糖与胶原等相比,该蛋白还可以121MB型氨基酸自动分析仪:日本三立精密仪器制保持高达98%的透明度,在高湿状态下的柔韧性与形造有限公司;722型紫外分光光度计:上海精密有限态保持也较为突出,有利于制造一些在临床或实验公司。中要求使用的生物医药产品与成骨材料[2]。我国蚕丝2实验技术方法资源非常丰富,因此综合利用蚕丝制备丝素蛋白具有很大的经济和研究开发意义。[
6、3]2.1实验流程收稿日期：2006-06-14作者简介：田三德(1954-),男,教授,主要从事食品生物技术和细胞工程的研究与应用工作。117No.1.2007工艺技术Na2CO3精炼CaCl2盐析溶液波长540nm比色,以OD值为横坐标、蛋白含量为纵蚕丝——————→精炼丝———————→丝素蛋坐标绘制标准曲线。标准曲线绘制基础检测数据见白溶液→透析脱盐→冷冻干燥→丝素蛋白粉末表1,标准曲线见图3。2.2精炼丝制备工艺技术的初步探索2.7.3样品的测定称取编号1、2、3丝素蛋白3份,2.2.1浴比对脱胶比率的影响分别将准确称取的8每份100.0g,分别
7、放入锥形瓶,加入0.05mol/LNaOH份1.0g蚕丝投入下列浴比为1∶10﹑1∶20﹑1∶30﹑1∶50﹑溶液5mL润湿,再加入20mL双缩脲试剂,振荡15min,1∶60﹑1∶70﹑1∶80﹑1∶100的0.5%的Na2CO3溶液中,在室温下放置45min,取部分溶液4000r/min离心煮沸,每次30min重复两次,将经过脱胶的蚕丝用10min,取上清液在波长540nm比色。蒸馏水冲洗干净,置80℃烘箱内烘干,称质量并编2.7.4丝素蛋白氨基酸分析分析方法仪器分析法号标记。(121MB氨基酸自动分析仪):将可溶性蛋白含量为2.2.2脱胶时间对脱胶比
8、率的影响分别将准确称取71.7%丝素蛋白粉110.0℃下水解22h
