Bt、CPTI双价杀虫基因对水稻遗传转化的研究

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1、东北农业大学硕士学位论文Bt、CPTI双价杀虫基因对水稻遗传转化的研究姓名：王珣申请学位级别：硕士专业：植物学指导教师：徐仲2003.5.1摘要／水稻是世界上最主要的粮食作物之一，全球有一半的人口以水稻为主食．据统计，我国水稻播种面积约占全球粮食播种面积的28．9％，总产量居所有粮食作物的首位。是我国人民的主要粮食之一。然而水稻生产却受到鳞翅目害虫的严重威胁，每年因虫害水稻减产在10％以上。本实验所应用的抗虫基因为双价抗虫基因，含有双价抗虫基因的转基因植株可以延缓害虫对转基因植株产生抗毒性，延长转基因作物的

2、使用寿命，充分发挥转基因作物的作用。，^户—一本实验所采用的抗虫基因为双价抗虫基因，通过农杆菌介导法、基因枪法、单细胞电击法对水稻推广品种东农419、东农420、东升16进行Bt基因遗传转化，探讨了共培养方式对抗性愈伤发生率的影响；抗氧化剂抑制转化愈伤组织褐化并恢复其生长状态的影响；不同酶及渗透压对单细胞解离的影响因素；确立了用于单细胞电击转化的悬浮细胞培养基及激素浓度：并获得转基因植株，通过GUS及PcR检测，初步证实目的基因已整合到水稻基因组中。关键词：农杆菌介导法；基因枪法；单细胞电击法；遗传转化；东

3、北农业大学理学硕士学位论文StudiesongenetiC缸’ansf．omationofBtinsect．resistantgenetoriceAbstractRiceisthemainfoodstuffintheworldandregardedasstaplefoodbyalmosthalfofpopulation．AccordingtoStar．：Theplantinganaofriceinourcou[nryoccupy28．9％ofitintheworld．Theoveralloutputoccu

4、pyprimacyinallfoodstuff．Buttheproductionofriceisaffectedbylepidopteralinsect．Thereductionofoutputexceed10％becauseofinsectpest．Thedoubleinsect-resistantgeneCanstavethemithridatismofinsectandextendusedtimeoftransformedriceinthisexperiment．Sothetransformedric

5、ecallexertactionplenty．Inthisexperimentthedoubleinsect-resistantgeneWaStransformedintoDongnong419，Dongnong420andDongsheng6thosealethepopularizedbreedswiththemethodsofco-cultivationwithA．tumefaciens、microprojectilebombardmentandelectroporation．Theeffectsofd

6、ifferentkindsofco-cultivationonPere．ofresistantcalli，theeffectofdifferentantioxidantsonrestoringgrowthstateandbrowninginhibitionoftransformedricecaili，TheeffectsofEnzymeandFilterpressureonseparationofsingercellandtheeffectofdifferentmediumonthegrowthofrice

7、suspendedcellwerestudied．ThemediumthatWaSusedinsingercell—electroporationWaSestablished．TheobtainedtransformedriceWaSprovedthatobjectivegenehaSbeentransformedinitbytheGUSandPCRexamine．Candidate：WangxunMajor：BotanySupervisor：AssociateProf．XuZhongKEYWORDS：Co

8、-cultivationwithA．tumefaciens；microprojectilebombardment；electropomtion；genetictransformation-ll-前言1．前言1．1目的与意义本实验具有重要的应用价值，实验所获得的转Bt基因水稻应用于农业生产中可得到巨大的经济价值和生态价值：水稻是世界上最主要的粮食作物之一，全球有一半的人口以水稻为主食。据统计，我国水稻播种面积约占全