普通生物化学.docx

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1、1)生物化学是用化学的原理和方法，从分子水平来研究生物体的化学组成（多糖，脂肪，蛋白质，核酸等），及其在体内的物质代谢转变规律（生长，发育，生殖，代谢，遗传，运动等）从而阐明生命现象本质的一门科学。2)糖（葡萄糖，果糖，半乳糖，核糖脱氧核糖）氨基酸及侧链碱基及相应核苷，核苷酸，环核苷酸脂类元件（甘油，脂肪酸，胆固醇，胆碱，肌醇）3)氨基酸的平均分子量1204)催化、结构、运输、运动、调节、贮存、防御、感觉、遗传调控、其他5)谷胱甘肽：谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸，谷氨酸以γ-羧基成键–SH酸性肽还原剂6)神经肽环状八肽莪蒿素环状十肽蛋白质许多氨基酸通过肽键连接

2、而成的大分子含氮化合物。干重45%脾肺80%蛋白质含量=6.25*样品含氮量茚三酮：570nm含苯环氨基酸280nmAnfinsen的核酸酶A的变性复性实验溶剂PH氨基酸序列弱相互作用非共价键次级键氢键范德华力疏水相互作用盐键离子键二硫键1)疏水塌缩模型、自由能漏斗模型2)分子伴侣：与部分折叠、错误折叠的蛋白质结合并帮助其正确折叠和成熟的一类蛋白质。热休克蛋白伴侣蛋白二硫键异构酶肽酰脯氨酸顺反异构酶囊肿性纤维化疯牛病3)测定蛋白质三维结构的方法：蛋白质晶体学核磁共振波谱学电镜三维重构4)两性解离等电点、胶体性质（透析、超滤、盐析法）5)蛋白质的测定：双缩脲

3、反应酚试剂反应茚三酮反应280nm紫外吸收光谱6)丙酮沉淀盐析沉淀免疫沉淀超速离心沉降系数7)分离纯化：抽提粗分离纯化柱层析分子排阻层析分子量大的先流出离子交换层析亲和层析抗体-抗原凝集素-糖蛋白底物类似物-酶酶活力单位：在25°C和最适条件下，一分钟催化1.0μmol底物转化所需的酶量为一个酶活力单位.总活力比活力8)电泳分离鉴别蛋白质纯度测定分子量测定等电点9)质谱SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳等点聚焦电泳双向凝胶电泳1)纤维蛋白简单规则的线性结构支持保护作用高抗拉强度α角蛋白、丝蛋白、胶原蛋白卷曲螺旋-原丝-初原纤维-中间丝α螺旋二硫键丝心蛋白反平行β折

4、叠富含AlaGly胶原蛋白左手螺旋3条Gly-X-Y1)肌红蛋白血红蛋白结合蛋白辅基脱辅基蛋白血红素辅基Fe2+肌红蛋白含一个血红素的单链球蛋白游离的血红素Fe2+可以被O2不可逆氧化配基结合位点配基结合分数空间位阻氢键O2COT-stateR-state别位效应S形曲线协同效应齐变模型序变模型血红蛋白别构蛋白别构调节H+CO2BPG2,3-二磷酸甘油酸β-6GluVal2)免疫系统免疫球蛋白抗原：能引起免疫应答的分子或病原体，如病毒、细胞、细菌细胞壁、其它大分子。诱导契合：配基的结合往往诱导蛋白构象发生变化，使结合更紧密多克隆抗体单克隆抗体酶联免疫吸附分

5、析免疫印迹免疫荧光3)肌动蛋白肌球蛋白分子马达肌球蛋白六个亚基两重四轻头部尾部粗肌球蛋白丝肌动蛋白细肌动蛋白丝模体(motif):数个至数十个AA组成的具有自身相对独立构象和功能的小区域，模体可构成结构域，也可独立存在。核酸吸收波长260nm酸水解糖苷键>磷酸酯键嘌呤>嘧啶RNA碱水解酶促水解RNADNA内切酶外切酶DNA限制性内切酶肺炎双球菌转化实验T2噬菌体共价闭合环状开环线性DNA三级结构连环数L=扭转数T+超螺旋数WDNA链核小体链纤丝玫瑰花结螺线圈染色体tRNACCA原核先导区翻译区多顺反子末端序列真核帽子单顺反子尾巴1OD26050mg/mlD

6、NA双链40mg/mlRNA离子强度碱基组成碱基错配DTm=16.6log[Na1+]/[Na2+]Tm=0.41(%GC)+69.3DTm=-1°Cx%mismatchforn>50bp核酸的凝胶电泳溴乙锭EB变性95退火50-60延伸72模板一对引物DNA聚合酶dNTP缓冲溶液卫星DNA高等重复序列>105大卫星小卫星微卫星单体酶寡聚酶多酶复合物多功能酶酪氨酸酶白化病苯丙氨酸羟化酶苯丙酮尿症异柠檬酸脱氢酶胶质瘤