人参蛋白抗辐射损伤作用研究

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1、人参蛋白抗辐射损伤作用研究作者：李红艳，赵雨，孙晓迪，白雪媛，赵大庆【摘要】　　目的研究人参蛋白的抗辐射损伤作用。方法以60Co-γ射线一次性照射小鼠全身，观察人参蛋白对照射小鼠外周血白细胞数，骨髓细胞微核数，红细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性，肝脏丙二醛（MDA）含量以及胸腺、脾脏指数的影响。结果人参蛋白能增加辐射后小鼠外周血白细胞数，减少骨髓细胞微核数，增加红细胞SOD活性，抑制肝脏MDA含量升高，提高胸腺及脾脏脏体指数。结论人参蛋白对γ射线所致小鼠辐射损伤有较好的保护作用。【关键词】人参蛋白；小鼠；辐射损伤　　Abstr

2、act：ObjectiveToobservetheprotectiveeffectofginsengproteinagainstradiationinjuryinmice．MethodsThemodelwasmadeinmiceby60Co-γradiation.Thequantityofperipheralwhitebloodcells(WBC)andbonemarrowcellsmicronucleuswerecounted,respectively.TheactivityofSODinredbloodcell,theco

3、ntentofMDAinhepar,andtheweightofthymusandspleenweredetermined,respectively.ResultsGinsengproteincouldincreasethequantityofWBC,theactivityofSODandindexofspleenandthymusorgan,9reducethequantityofbonemarrowcellsmicronucleusandthecontentofMDA.ConclusionGinsengproteinise

4、ffectiveinprotectingtheγ-radiationinjuryinmice.　　Keywords：Ginseng;Mice;Radiationinjury　　人参为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Meyer的干燥根。大量研究显示，人参单味药及复方药均具有明显的抗辐射作用［1］，但目前研究大多针对人参皂苷及多糖类，认为皂苷与多糖是人参抗辐射作用的主要成分［2～6］，对于蛋白类成分抗辐射研究未见报道。本实验通过观察人参蛋白对辐射小鼠损伤的保护作用，为进一步研究人参蛋白的抗辐射作用奠定基础。　　1材料

5、与仪器　　1.1药物5年生人参购自吉林靖宇县，为五加科植物人参(PanaxgisengC.A.Mey.的干燥根。人参蛋白样品为本实验室制备，经Bradford蛋白含量试剂盒法测定蛋白含量为80%。　　1.2动物9　　由吉林大学实验动物中心提供的ICR小鼠，雄性，体质量18～22g。动物质量合格证号：10-1023。　　1.3仪器与试剂　　贝克曼-库尔特5分类血球计数仪，Backman公司；XS-212-201双目光学显微镜，Jnoec公司；UVmini-1240型紫外可见分光光度计，Shimadzu公司；SOD试剂盒、MDA试

6、剂盒，南京建成生物研究所。　　2方法　　2.1动物分组　　取40只小鼠，随机分为4组，即正常对照组，辐射对照组，人参蛋白高剂量组（1mg/g）及人参蛋白低剂量组（0.5mg/g）。各组均为灌胃给药，1ml/次，对照组灌服等体积蒸馏水。连续给药7d后，除正常对照组外，其余3组均实施一次性60Co-γ射线全身照射，照射剂量为2Gy。　　2.2外周血白细胞计数9　　照射后24h尾静脉采血20μl，加入到0.38ml2%HAc溶液中，充分混匀，加入血球计数板中，在显微镜下读取白细胞(WBC)个数。　　2.3骨髓细胞微核计数　　照射后2

7、4h小鼠颈椎脱臼处死，取胸骨，用止血钳挤出骨髓液与玻片一端的小牛血清混匀，常规涂片。涂片自然干燥后放入甲醇中固定5～10min。将固定好的涂片放入Giemsa应用液中，染色10～15min。立即用蒸馏水冲洗，晾干，镜检。选择细胞完整、分散均匀、着色适当的区域，在油镜下观察。以有核细胞形态完好作为判断制片优劣的标准。　　2.4红细胞SOD活性及肝脏MDA含量测定　　小鼠颈椎脱臼处死后，立即眼球取血并剥取肝脏。全血经生理盐水冲洗，冷双蒸水混合、95％乙醇振荡、三氯甲烷抽提制备SOD抽提液，按照试剂盒说明书测定SOD活力。肝组织经生

8、理盐水冲洗，磷酸盐缓冲液匀浆制成5％组织匀浆液，取上清按照试剂盒说明测定MDA含量。　　2.5脏体指数计算照射24h后，分别对各受试小鼠进行称重。小鼠处死后分别取出胸腺和脾脏称量，计算胸腺、脾脏的脏体指数比。9　　2.6数据处理与分析数据以±s表示，组间差异按Poisson分