苎麻GalAT、UGlcAE基因克隆及组织表达研究

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1、中国农业科学院博士学位论文苎麻GalAT、UGlcAE基因克隆及组织表达研究姓名：刘建新申请学位级别：博士专业：作物遗传育种学指导教师：熊和平20080601族基因之一)同源性最高。多序列比对分析表明，苎麻UGIcAE基因推定氨基酸序列与其它物种相应序列存在较高的的保守性，分子进化分析发现苎麻的UGIcAE基因推定的氨基酸序列与拟南芥UGIcAE家庭基因GAE6的同源性高于其它植物以及拟南芥的其它UGIcAE家族基因。(5)研究了GalAT基因在苎麻中苎一号中各组织的表达分布情况，通过实时荧光定量PCR证实，GalAT基因在苎麻各个组织中都有

2、表达，其中根部的GalAT基因表达量占优，叶片次之，韧皮部和木质部含量最少，并且两者无显著差别。(6)研究了UGIcAE基因在苎麻中苎一号中各组织的表达分布情况，通过实时荧光定量PCR证实，UGIcAE基因在苎麻各个组织中都有表达，UGIcAE基因的mRNA量依次为根部)叶片)韧皮部)木质部。(7)比较了GalAT和UGIcAE基因在苎麻各组织表达情况的差异，两基因在各组织中的表达情况基本一致，都表现为根部)叶片)韧皮部)或。木质部，在本研究感兴趣的韧皮部中，GalAT基因的表达量是UGIcAE基因的0．6533倍，提出在后期进行苎麻果胶分子

3、调控试验可优先从GalAT基冈入手或同时进行双基冈共抑制。综上所述，本研究在分离和克隆苎麻果胶合成相关酶GalAT．．UGIcAE基因及其组织表达特征研究方面取得了一定进展，为后期从分子水平上调控苎麻果胶含量，获得低果胶含量的优良苎麻转基因新品种奠定了基础。关键词：苎麻，果胶，GalAT，UGIc．AE，实时定量PCR法AbstractRamie[Boehmerianivea(Linn．)Gau正】bastfiberisakindoffineplanttextilematerialswithchinesefeature，however,sta

4、plechemicaldegummingmeansinramieforindustrialproductionhavemanysuchshortcomingaslowerbastfibrestrength，loweressentialfiberproductivity，deterioratenspinnabilityoffibre；prolongprocessflow；heightendegumingcosts；increasealkalicontentofboiling-epurateexhaustedliquid，pollutesurro

5、undingsseverely；consumeenergysourceheavily，allofwhichrestrictseverelydevelopmentofbastfiberspinindustry．Pectinisoneofprimarycolloidalmatteroframiephloem，anditscontentnexttohemicellulouseincolloidalsubstance．Pectinstickallkindsofcolloidalsubstancestogether，whichmakeramieanot

6、hercolloidalsubstancestounfixmoredifficultly，SOremovingpectinisoneofkeysinramiedegummingprocess．Lowerpectincontentmoderatelyisaimportantdirectionoframiehighquali够breedingatpresent．GalAT(a-1，4一Galacturonosyltransferase)andUGIcAE(UDP—glucuronicacid-4-epimerase)aretwokeyenzyme

7、sinpectinandpectinmajorcomponentbiosynthesis，respectively．Thus，someresearchesongenesequenceandtissueexpressioncharacteristicofG口以randUG脚genehavepracticalsignificancetoregulateandcontrolpectincontentbymolecularbiologymetllodinourlaterexperiment．．Intheresearch，SMARTtechnology

8、wasusedtoconstructfulllengthcDNAlibraryoframiephloem；DegenerateprimerRT-PCRmethodW