抗核抗体检测和临床意义_张瑾

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1、抗核抗体检测及其临床意义宁波市李惠利医院张瑾风湿免疫性疾病诊断方法症状、体征自身抗体影像学检查病理风湿免疫性疾病相关自身抗体抗核抗体谱（ANAs）类风湿关节炎相关抗体(RF,抗CCP等)抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）抗自身免疫性肌炎谱自身免疫性肝病相关抗体谱抗磷脂抗体谱抗核抗体谱检测的意义有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断抗Sm抗体是SLE的标记抗体；抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体；抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体；观察疾病活动度和治疗反应抗dsDNA抗体研究发病机理抗核小体抗体、抗dsDNA抗体基本概念ANA荧光核型ANAs中的常见抗体抗核抗体自身抗体：指抗

2、自身组织、器官、细胞及其成分的抗体ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA存在一个谱。ANA新概念：抗核酸(Nucleicacid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗体总称某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富(如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)ANA检测方法-IIF法ANA滴度ANA核型ANA滴度的意义结缔组织病的粗筛（>1:160）阳性标本还需进一步识别感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性ANA阴性基本可以除外SLEANA滴度与疾病活动性无明确相关性荧光显微镜下ANA的染色型别均质型（H）核膜型（M)斑点型（S）核仁型（N）着丝

3、点型（ACA）胞浆型（C）混合型均质型(H)抗组蛋白抗ds/ssDNA抗核小体主要出现在SLE中均质型(H)核　膜　型(M)主要与抗dsDNA有关与抗原底物片固定方法和备制过程有关出现在SLE中部分与抗核包膜蛋白有关抗板层素抗gp210出现在PBC中核　膜　型(M)与抗ENA成分有关抗Sm抗RNP抗SS-A抗SS-B出现在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等斑点型(S)斑点型(S)与抗核仁蛋白有关抗Scl-70抗RNA多聚酶I抗PM-Scl出现在SSc中核仁型(N)核仁型(N)与抗着丝点染色质有关存在于有丝分裂期出现在SSc、CREST综合征等中着丝点型(ACA)

4、着丝点型(ACA)与抗胞浆成分有关抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ抗信号识别颗粒（SRP)抗线粒体：出现在PBC中抗高尔基体抗溶酶体等等胞浆型(C)见于PM/DM胞浆型(C)ANA荧光核型小结均质型（H）：像大饼，SLE相关核膜型（M)：像圈圈，SLE相关斑点型（S）：像藕片，抗ENA核仁型（N）：像纽扣，SD相关着丝点型（ACA）：像满天星，抗ACA胞浆型（C）：像空心大饼,SLEPM/DMPBC相关混合型：稀释后检测有助于区分抗核抗体谱（ANAs）ANAs抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色体DNA蛋白

5、抗核仁抗体抗DNA抗体抗核小体抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,PCNA…….dsDNAssDNA抗着丝点抗体（ACA)抗5sRNA抗dsDNA检测方法以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)：≥1:5短膜虫或马疫锥虫的动基体内含有天然纯dsDNA，未经人工处理，不含组蛋白与ssDNA，抗原性纯一特异。优点：特异性好抗dsDNA检测方法酶联免疫吸附法（ELISA）:≥100IU/ml优点：敏感性最高缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而这两种

6、致病力均不强放射免疫法(Farr):≥20%优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响蛋白印迹法（WB）缺点：dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果不同方法检测SLE患者抗dsDNA抗体的结果：everythingispossible至少用两种方法做（报告结果时注明方法学）,互为补充。如：IIF法+ELISA法抗dsDNA抗体临床意义SLE的血清特异性抗体多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关与LN与SLE疾病活动性相关，活动期达90％可用于SLE疾病活动期判断＆药物疗效观察与SLE急性

7、皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关抗组蛋白抗体（AHA）（酶联免疫吸附法X2SD)可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性SLE：50%活动期SLE可达90.2%与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性药物性狼疮（DIL）：>90%如：异烟肼、苯妥因钠、青霉胺、雌激素等仅有AHA而无其他ANA，强烈支持DIL其他结缔组织病：23-30%如：RA、PBC、SSc等核小体是真核细胞染色质的基本复制单位，由组蛋白与DNA组成。参与SLE发病机制：多克隆B细胞活化剂产生ANuA，先于其他ANA促进抗d