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时间:2019-05-09
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1、5‘-核苷酸酶(5-NT)的检测和临床意义一.定义5‘-核苷酸酶全称5’-核糖核苷酸磷酸水解酶(5‘-Nucleoticlase,5’-NU或5‘-NT)。5’-核苷酸酶(5‘-NT)是一种对底物特异性不高的水解酶,可作用于多种核苷酸。主要参与核酸的分解代谢。能特异性的催化核苷5’-核苷酸酶和次黄嘌呤核苷酸。5‘-NT在人体的运动,细胞生长发育,纤维蛋白合成,提高表皮或内皮屏障功能,神经传递及淋巴细胞的再循环及黏附,免疫应答等方面均发挥重要的作用。广泛分布在肝、胆、胰、肠、心、脑、肺、肾、垂体、甲状腺、前列腺、
2、睾丸等脏器和组织中,定位在细胞膜上,肝胆系统是血清中5’-核苷酸酶的主要来源。在肝内主要存在于胆小管和窦状间隙内。二.来源和去路5‘-NT要释放入血必须要经肝胆系统内的高浓度胆汁酸去垢处理三.检测方法钼蓝比色法化学发光法酶法偶联速率法四.实验原理5′-核苷酸酶(5′-NT)催化5′-次黄嘌呤核苷酸水解生成次黄苷和氨,次黄苷在嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶(XOD)作用下生成尿酸和过氧化氢(H2O2),H2O2与4-氨基安替比林(4-AA)和TOOS在过氧化物酶(POD)作用
3、下生成醌亚氨化合物,通过测定相应波长处吸光度变化值得出样本中5′-NT活性。五.标本的采集及保存1.细胞培养物:离心后收集上清液,并将标本保存于-20℃。2.血清:室温放置2小时内或2-8℃24H,1000xg离心20分钟。3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于1000xg离心15分钟。4.2-8℃可放置24小时,-20℃可放置一星期,但应避免反复冻融。标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。六.参考范围速率法:正常成人血清5’-NT酶活性为:0-11U/L钼蓝双色法:
4、健康成年人5’-NT活性为2-17U/L,儿童稍低。60岁以上老人的均值约为青壮年的2倍。七.临床意义⒈5-NT活性增高常见于原发性和转移性肝癌、胆道癌、胰腺癌、胆道阻塞、胆管炎、急、慢性肝炎、肝硬化、药物性肝损伤。其活性增高可达2~6倍,且与病情严重程度呈正相关。⒉5-NT是诊断肝肿瘤非常灵敏的酶学指标。在病变早期,当肝功能、肝扫描和有关肝病检查阴性时本酶活性已明显增高。对于AFP阴性病例,其与AFP互补诊断肝癌的阳性率可达94%。⒊特异性高,能协助判断碱性磷酸酶(ALP)增设是肝胆系统疾病,还是骨髓系统疾病
5、(如骨癌、骨肉瘤、骨转移癌、佝偻病等)。ALP在肝胆系统疾病和骨骼系统疾病时均可增高。除5-NT除肝胆系统疾病增高外,骨骼系统疾病一般均不升高。⒋有助于鉴别诊断肝细胞性黄疸和阻塞性黄疸。后者5-NT明显高于前者。⒌5-NT已作为肝功能常规项目检查进入临床,将能使临床医生更全面地了解患者肝脏情况,提高其临床应用价值。谢谢服务理念中的“点点”◆理解多一点真情浓一点◆学习勤一点品质高一点◆理由少一点效率高一点◆处理问题灵活点工作过程用心点◆对待同事宽容点互相协作快乐点放映结束!敬请各位的批评指导!谢谢观看
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