(临床医学)临床免疫检查

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1、临床常用免疫学检查山西医科大学第二医院风湿科高惠英临床常用免疫学检查免疫功能检测血清免疫球蛋白血清补体细胞免疫自身抗体肿瘤标志物检测病毒性肝炎病原标志物检测及其他病原体感染免疫检测检测方法间接免疫荧光法(IIF)酶联免疫吸附法(ELISA)放射免疫法(RIA)被动血凝法(PHA)颗粒凝集法(PA)对流免疫电泳法(CIE)免疫双扩散法(ID)流式细胞术(FCM)一、免疫功能检测（一）血清免疫球蛋白体液免疫(immunoglobulin,Ig)由浆细胞合成分泌具有抗体活性的一组球蛋白存在于血液、体液、外分泌液

2、、细胞膜据功能和理化性质不同分五大类IgGIgAIgMIgDIgE免疫球蛋白---体液免疫IgG含量最多，占70-80%，唯一能通过胎盘再次免疫应答的标志IgA分两型:血清型，分泌型分泌型机体局部免疫（呼吸道、消化道、泌尿道感染）起更重要作用IgM分子量最大占5－10%。初次免疫应答的Ig，最早出现的IgIgE与Ⅰ型变态反应有关，血清中含量最少约0.002%与过敏原测定相关免疫球蛋白临床意义1.IgGIgMIgA均升高：见于慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和自身免疫性疾病IgE升高与过敏性疾病、寄生虫感

3、染相关2.单一免疫球蛋白增高：见于免疫增殖性疾病如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症3.免疫球蛋白降低各类先天性免疫缺陷病、获得性先天性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、长期应用免疫抑制剂的病人血清M蛋白—单克隆Ig由单克隆B细胞增殖产生临床意义提示单克隆Ig增殖性疾病，见于多发性骨髓瘤(MM)巨球蛋白血症恶性淋巴瘤等（二）补体(complement,C)检测补体是一组具酶原活性的糖蛋白九种成分C1-C9参与抗感染及免疫调节，也介导病理性反应补体功能下降、成分减少可用于疾病诊断和疗效评估总补体溶血活性(CH50)

4、检测反映补体传统途径活化的活性程度补体C3含量最多是经典和旁路途径被激活的关键物质补体C4功能较多经传统途径活化促进吞噬中和病毒防止免疫复合物沉着总补体溶血活性(CH50)、补体C3C4临床意义增高:急性炎症急性组织损伤恶性肿瘤急性传染病等减低:各种免疫复合物性疾病如肾小球肾炎SLE、RA等自身免疫病慢性肝病、肝硬化、肝坏死、AIDS、重度营养不良症、遗传性补体缺乏症补体C1q检测意义增高:骨髓炎、痛风等减低:SLE、MCTD、重度营养不良等（三）细胞免疫检测T细胞亚群T细胞花结形成试验(测定T细胞数量)

5、T细胞转化试验(体外测定T细胞的生物学功能)T细胞分化抗原测定CD3＋、CD4＋(TH)、CD8＋(TS)、CD4＋/CD8＋（FCM):检测AIDS、血液肿瘤分型、自身免疫疾病（三）细胞免疫检测临床意义CD3＋（总T细胞）降低：自身免疫性疾病:SLERACD3＋/CD4＋(TH)降低：恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、用免疫抑制剂者CD3＋/CD8＋(TS)降低：自身免疫病、变态反应疾病CD4＋/CD8＋比值增高：自身免疫性疾病、变态反应、病毒性感染CD4＋/CD8＋比值降低：艾滋病、恶性肿瘤复发（三

6、）细胞免疫检测B细胞浆细胞体内唯一能产生抗体（Ig分子）的细胞CD19等单克隆抗体测定B细胞数升高见于急性白血病降低无丙种球蛋白血症、化疗和免疫抑制剂后自然杀伤细胞（NK细胞）活性测定判断机体抗肿瘤、抗病毒的指标（四）细胞因子(cytokine,CK)检测-CK为免疫调节性小分子多肽检测方法酶联免疫测定ELISAPCR技术白细胞介素2活性及受体免疫应答、抗病毒等作用肿瘤坏死因子抗感染效应、抗肿瘤作用干扰素一种非特异性防御因子抗病毒、抗肿瘤、调节免疫、控制细胞增殖二、自身抗体检测风湿性疾病风湿性疾病常见自身

7、抗体抗核抗体类风湿关节炎早期血清学自身抗体抗中性粒细胞胞浆抗体１、抗核抗体（Anti-nuclearantibodyANA）——结缔组织病(1)抗核抗体ANA——定义ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA是结缔组织病的筛选试验。ANA谱:针对不同成分,构成抗核抗体谱（Anti-nuclearantibodies,ANAS)。有助于CTD的诊断、鉴别诊断、分型、判断疗效及预后。(２)按抗不同靶抗原成分抗体分类抗单链DNA抗体抗双链DNA抗体抗非组蛋白抗体抗Sm抗体抗RNP抗体抗S

8、SA抗体抗SSB抗体抗Scl－70抗体抗Jo－1抗体抗其它细胞成分抗体抗核仁抗体抗着丝点抗体抗DNA抗体ANAS分类抗组蛋白抗体抗ENA抗体(3)抗核抗体检测原理+复合物抗原抗体底物（抗原）被检血清（抗体）+第二抗(4)检测方法及荧光图谱：间接免疫荧光法IIFHep-2细胞(人喉癌细胞)作抗原底物,目前国内外通用的方法是金标准均质型又称弥散型，染色质均匀一致,此型与抗ds-DNA、抗组蛋白抗体和核小体抗体有关。可见于多种自身免