第二节 细胞工程简介 二 动物细胞工程

《第二节 细胞工程简介 二 动物细胞工程》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、第二节细胞工程简介二动物细胞工程常用的技术手段动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体胚胎移植核移植动物细胞培养培养液葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等植物组织培养基一、动物细胞培养1、过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系遗传物质未改变遗传物质改变问题：、比较动物细胞培养和植物组织培养培养瓶中培养动物细胞培养与植物组织培养的比较比较项目植物组织培养动物

2、细胞培养培养基的物理性质固体液体培养基的成分水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等结果新的植株或组织细胞系或细胞株目的①植株快速繁殖②脱毒植株的培育③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究取材植物细嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织其他条件均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件动物细胞培养应用生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）检测有毒物质用于某些器官移植例一：下列关于动物细胞培养的叙述

3、，正确的是（D）A.培养中的效应T细胞能产生单克隆抗体B.培养中的B细胞能够无限地增殖C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞二、动物细胞融合1、过程：细胞A细胞B杂种细胞物理法、化学法灭活的病毒2、用途：制备单克隆抗体融合过程示意图三、单克隆抗体1、概念:单：单个细胞克隆:无性繁殖抗体:化学性质单一、特异性强2、单克隆抗体制备过程2.特点：特异性强，灵敏度高。3.应用（1）理论意义（2）实践意义①单抗诊断盒；②生物导弹。13归纳总结植物体细胞杂交和单克隆抗体制备植物体细胞杂交动物细胞融合（单克隆抗体制备）理论基（原理）

4、细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶）注射特定抗原，免疫处理正常小鼠促融方法（1）物理法：离心、振动、电刺激（2）化学法：聚乙二醇（1）物、化法：与植物细胞融合方法相同（2）生物法：灭活的病毒14过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体的融合（物、化法）动物细胞的融（物、化、生法）第三步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯例二、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（B）A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用纤维素酶

5、处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C.用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体四、胚胎移植实例：试管动物的产生试管婴儿应用：加快优良种畜的繁殖速度五、核移植技术实例：克隆羊多莉18例三据图回答下列问题：（1）过程①②是用纤维素酶和果胶酶处理细胞的细胞壁，后经③过程诱导原生质体融合，实际融合的过程中原生质体可能会形成3种细胞团（只考虑两个细胞融合的情况）。④是细胞壁再生的过程，与此过程密切相关的细胞器是高尔基体。19（2）在⑤过程培养中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外

6、,还需要在培养基中加入植物激素。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证无菌。（3）若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育（假设能成功）,得到的后代应含（A+B）/2条染色体，还必须用秋水仙素来处理幼苗，才能得到可育的番茄——马铃薯植株，此时体细胞中含有A+B条染色体。（4）若番茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则杂种植株六倍体。20动物细胞培养和单克隆抗体的制备例2下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图，据图回答下列问题：（1）技术是进行单克隆抗体制备的基础。（2）根据培养基的用途分类

7、，图中HAT培养基属于选择培养基。21（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强、灵敏度高。（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用灭活的病毒。（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞在体外大量增殖的特点，又具备淋巴细胞分泌特异性抗体的特点。（6）淋巴细胞是由动物体骨髓中的造血干细胞细胞分化、发育而来的。（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是主动运输。22答案(1)动物细胞培养（微生物培养）（2）