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《广西2020版高考生物一轮复习考点规范练34基因工程含解析新人教版》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、基因工程1.(2017全国Ⅲ卷)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。图1图2回答下列问题。(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是 。 (2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为 ,加入了 作为合成DNA的原料。 (3)现通过基因工程的方法获得了甲、乙、丙三种蛋白
2、,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。①由图2可知:当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是 。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是 。 ②仅根据图1、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少 (填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,会降
3、低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。 答案(1)编码乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子(2)模板 dNTP(3)①进行细胞传代培养 维持培养液的pH ②C解析(1)由基因乙的碱基序列可知,由该序列转录出的mRNA无起始密码子,所以在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列后,所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙。(2)PCR反应体系中除了加入DNA聚合酶、引物等,还应加入序列甲作为模板,加入四种脱氧核苷酸(dNTP)作为合成DNA的原料。(3)当细胞浓度达到a时,T淋巴细胞的浓度不再增加,是因为出现了接触抑制现象,所以可以进行细胞传代培养,使T淋巴细胞继
4、续增殖;细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是维持培养液中的pH。根据图2可知,甲、乙两组的T淋巴细胞数量多,丙组的T淋巴细胞数量少,根据图1比较可知,丙组T淋巴细胞少的原因是蛋白丙缺少C片段所编码的肽段。2.科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题。(1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用 技术对目的基因进行扩增,该技术需要的条件是 、酶、原料、模板,该技术必须用
5、 酶;然后构建基因表达载体,基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外,还需具有 。 (2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是 。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用 酶对外源DNA、质粒进行切割。 (3)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程
6、是 。 答案(1)PCR(聚合酶链式反应) 引物 耐热的DNA聚合酶或热稳定性的DNA聚合 标记基因(2)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 BamHⅠ和HindⅢ(3)抗盐基因(或目的基因) 将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中,观察该烟草植株的生长状态解析(1)依题意可知,抗盐基因属于目的基因,可采用PCR(聚合酶链式反应)技术扩增目的基因,该技术需要的条件是引物、酶、原料、模板,利用PCR技术扩增目的基因时,每次循环都是在90~95℃时进行变
7、性、在55~60℃时进行复性、在70~75℃时延伸,所以该技术需要用热稳定DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶)。基因表达载体由目的基因、启动子、终止子、标记基因等组成。(2)题图显示,质粒上的M抗生素抗性基因和目的基因中都含有SmaⅠ酶的识别和酶切位点,若使用SmaⅠ酶切割,会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因,因此不能使用SmaⅠ酶切割。抗盐基因(或目的基因)的两侧都有EcoRⅠ酶的识别和酶切位点,因此用EcoRⅠ酶切割目的基因会出现自身环化;B
