褐煤精华液对无盐及盐胁迫下小麦萌发的影响

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1、褐煤精华液对无盐及盐胁迫下小麦萌发的影响　　摘要：初步研究了褐煤精华液（browncoaldistillate，BCD）溶液的组成成分及其对小麦种子萌发的影响。用不同浓度的BCD处理小麦种子烟农19和鲁原301，在无盐胁迫和125mmol/LNaCl胁迫条件下培养小麦3d后测定种子发芽率、胚芽鞘的相对伸长速率、质量、渗透调节能力、丙二醛含量及胚根质量。结果显示，BCD能促进小麦种子的发芽，增加胚芽鞘和胚根的质量，提高发芽种子在盐胁迫下的渗透调节能力，降低胚芽鞘中膜脂过氧化产物的增加量。由此推断，BCD可以

2、缓解盐对小麦萌发阶段的伤害，促进小麦种子的萌发　　关键词：褐煤：褐煤精华液；黄腐酸；小麦；盐胁迫　　中图分类号：S512.1　　文献标识码：A　　文章编号：1007-7847（2014）05-0423-08　　一般认为，黄腐酸（fulvicacid，FA）是腐植酸类物质中相对分子质量最小、溶解度最高、生物活性电最强的部分，其含活性官能团多，易被生物体吸收利用。大量研究表明，黄腐酸具有抗盐、抗旱、调节植物生长等诸多植物生理活性。本课题组长期从事黄腐酸化学组成和生物活性的研究，在通过H202氧化降解褐煤的方法

3、制取黄腐酸过程中得到一种无色透明的蒸馏液，该溶液pH值为2～3，密度为1.02～1.05g/cm3，其中最大相对分子质量小于500（液质联用测定）。初步活性筛选发现，该溶液具有比黄腐酸更强的缓解盐胁迫对小麦种子伤害的活性，同时在无盐胁迫下也具有明显的提高种子发芽率和促进胚芽胚根生长的作用。我们将这种无色透明的溶液命名为褐煤精华液（browncoaldistillate.BCD）。　　本研究通过测定BCD处理过的两种小麦烟农19和鲁原301的发芽率、胚芽鞘的相对伸长速率和胚芽鞘胚根的长度、鲜重。干重以及胚芽

4、鞘中脯氨酸、可溶性糖、K+、Na+、丙二醛（malondialde-hyde，MDA）含量等指标，系统地考察了BCD埘无盐及盐胁迫下小麦种子萌发的影响。通过BCD对小麦抗盐胁迫活性的研究，以期发现一类新的抗盐活性物质，为小麦抗盐胁迫研究提供理论基础，也为植物抗盐碱高级肥料的开发及盐碱耕地的合理、有效利用提供技术支持。　　1　　材料与方法　　1.1材料　　褐煤采白云南峨山县小棚租煤矿.干燥后粉碎，过80目筛，进行理化性质分析。供试种子为小麦种“烟农19”和“鲁原301”。改良的Hoagland's培养液：参

5、照文献[9]配制。　　1.2　　BCD的制备　　将lkg褐煤置于反应容器中，加入浓度为15%的H2O2溶液2L，连续搅拌3h，温度控制在35℃。待氧化反应完成后.将产物离心10min（转速4000r/min），过滤后的上清液即为黄腐酸溶液。将黄腐酸溶液置于旋转蒸发仪中，在50℃下抽真空旋蒸。旋蒸完成后得到的同体物质为黄腐酸粗晶。冷凝下来的无色透明的蒸馏液即为褐煤精华液，经测定pH值为2.5，密度为1.04g/cm3。用蒸馏水将BCD分别稀释为原浓度的（1、5、10、15、20、30、40、50）‰备用。　

6、　1.3BCD的气质联用分析条件　　仪器型号：Clarus600气质联用仪（PerkinElmer，USA）。　　气相色谱条件f超纯水洗针进样）：FFAP色谱柱（AgilentTechnologies，USA）；进样口温度：240℃，氢火焰离子化检测器温度300℃，载气为高纯氦；进样量为0.6μL；柱流量为2mL/min；程序升温：柱温为60℃，恒温3min，以2℃/min升至180℃，恒温20min.总用时问83min；不分流模式进样。　　质谱条件：质谱接口温度为260℃，离子源温度200℃：电轰击电离

7、方式；电子能量70eV；扫描质量范围30～430amu：溶液延迟时间为5mln：进样量lμL；传输线温度200℃。　　1.4　　种子的致敏及萌发　　取籽粒饱满的种子用自来水漂洗，经10%NaCl0消毒10min后用无菌蒸馏水冲洗7次。蒸馏水和不同浓度的BCD作为致敏液将小麦种子浸泡2h进行致敏，共l8批。取同批致敏一致的种子150粒，整齐摆放到3个直径为12cm的培养皿中（铺有1层滤纸），每皿50粒，各加入10mL，Hoagland's培养液。其中，用蒸馏水致敏的空白对照组（controlcheCk1，C

8、Kl）和（1、5、10、15、20）‰BCD组不加NaCI；用蒸馏水致敏的模型对照组（controlcheck2，CK2）和（10、20、30、40、50）‰BCD组分别培养在NaCl浓度为125mmol/L（盐敏感临界浓度）的改良Hoagland's培养液中；共24组。用恒温培养箱进行培养，昼夜温度分别保持在16～26℃和10～16℃，平均光周期为14h。每天用称重法在培养皿中注水补充蒸发失去的水分，保证盐浓度的恒定。　　1