毕业设计（论文）--HCV核心区基因片段（C70-140）的原核表达

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1、学号：14083400784毕业设计（论文）题目：HCV核心区基因片段（C70-140）的原核表达作者：届别：系别：化学化工学院专业：生物工程指导老师：职称：完成时间：2012年5月20日湖南理工学院本科毕业论文摘要湖南理工学院本科毕业论文摘要Ⅰ湖南理工学院本科毕业论文摘要摘要在大肠杆菌中表达HCV核心区基因片段（C70-140）,构建一个pBVIL-70-140原核表达载体，用于丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)和丙型肝炎抗体(HCV-Ab)联合检测。通过逆转录PCR扩增HCV核心片段，RT-PCR产物经XhoI和XbaI双酶切后连接到经同样酶切的

2、pBVIL原核表达载体中,转化大肠埃希氏菌BL21，并以IPTG诱导蛋白表达，SDS-PAGE鉴定。结果表明，将目的基因与表达载体pBVIL进行连接，得原核表达载体pBVIL-70-140，该载体转化大肠埃希氏菌BL21后可诱导表达出分子量约为25KD的重组蛋白。关键词：丙型肝炎病毒;核心区基因片段(C70-140)；原核表达Ⅰ湖南理工学院本科毕业论文摘要Ⅰ湖南理工学院本科毕业论文AbstractⅡ湖南理工学院本科毕业论文AbstractAbstractTheobjectiveistoexpresstherecombinantHCVcoregenef

3、ragment(C70-140)inEscherichiacoliandbuildapBVIL-70-140prokaryoticexpressionvectorforthehepatitisBcoreantigen(HCV-cAg)andhepatitisCantibodies(HCV-Ab)combineddetection.HCVcorefragmentwasamplifiedbyRT-PCRandtheproductwasdigestedbyXhoIandXbaI,thenthefragmentwasinsertedintoanEscheri

4、chiacoliprokaryoticexpressionvectorpBVIL，andusedtotransformE.coliBL21.ThetargetproteinwasexpressedinBL21andinducedbyIPTG，andtheexpressedproteinwasindentifiedbySDS–PAGE.WegotthepBVIL-70-140prokaryoticexpressionvectorbyconnectingthepurposegeneandexpressionvectorpBVIL,theresultsho

5、wedthatthepBVIL-70-140prokaryoticexpressionvectorcaninducetheexpressionoftherecombinantproteinmolecularweightofabout25KDthroughthetransformationofEscherichiacoli.Keywords:HCV;Coregenefragment(C70-140);ProkaryoticexpressionⅡ湖南理工学院本科毕业论文AbstractⅡ湖南理工学院本科毕业论文目录1湖南理工学院本科毕业论文目录目录中文摘

6、要……………………………………………………………………………Ⅰ英文摘要……………………………………………………………………………Ⅱ前言…………………………………………………………………………………1一、材料与方法……………………………………………………………………31、材料………………………………………………………………………………31.1实验仪器………………………………………………………………………31.2实验酶及主要试剂……………………………………………………………31.3试剂盒…………………………………………………………………………41.4分子

7、量标准……………………………………………………………………41.5引物……………………………………………………………………………41.6菌株和载体……………………………………………………………………41.7实验血浆………………………………………………………………………42、方法………………………………………………………………………………42.1主要溶液配制…………………………………………………………………42.2培养基配制……………………………………………………………………52.3丙型肝炎病毒RNA提取……………………………………………………62.4

8、引物设计………………………………………………………………………62.5逆转录成cDNA……………………………