龙牙百合原生质体制备与电融合条件初探--论文

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1、本科生毕业设计(论文)中文题目　龙牙百合原生质体制备与电融合条件初探外文题目　PreparationandfusionofprotoplastoflongyaLilyoptimizationt学　　号　0908180009　　　　　　姓　　名　　　　　　　　程思睿　　　　　　　学　　院　　　　　　生命科学学院　　　　　专　　业　　　　　　生物工程　　　　　　指导教师　　　　　　　涂艺声教授　　　　完成时间　　　　　2013年5月2日　　　　　江西师范大学教务处制目录摘要3Abstract41绪论51.1龙牙百合现状以及实验意义所在51.2原

2、生质体研究概况61.2.2原生质分离61.2.2.1影响原生质体分离的因素71.2.2.1.1酶71.2.2.1.2酶解时间81.2.2.1.3pH值81.2.2.1.4温度81.2.2.1.5预处理81.2.3影响原生质体电融合的因素………………………………………………………….82材料与方法92.1实验材料92.2实验方法与思路92.2.1龙牙百合的组织培养…………………………………………………………………..92.2.2酶浓度对原生质体产量的影响92.2.3酶解时间对原生质体产量的影响92.2.4离心操作………………………………………

3、……………………………………...102.2.5原生质体成串状排列的条件测定………………..…………………………………..102.2.6原生质体电融合的最佳条件测定……………………………………………………103结果与分析123.1龙牙百合原生质体制备条件研究……………………………………………..……..123.1.1酶液组成对原生质体产量的影响123.1.2酶解时间对原生质体产量的影响123.1.3原生质体电融合的最佳条件分析124结果总结14参考文献15附录A16A.1.主要试剂17A.2主要溶液的配制17A.3设备和仪器18致谢1920

4、摘要本文以龙牙百合试管苗为材料，研究了不同浓度的酶液和酶解时间对获得龙牙百合原生质体产量的影响；进一步探究了原生质体电融合适宜的条件。实验主要结果如下：1龙牙百合原生质体制备的最佳条件：酶液组成为1%的纤维素酶+1%果胶酶，酶解的最佳时长为3.5小时，。2龙牙百合原生质体电融合最佳条件为交流电压6V持续时间50S直流电压300V脉冲时间25μS脉冲次数为10次关键词：龙牙百合，原生质体制备，酶液组成，原生质体电融合20PreparationandfusionofprotoplastoflongyaLilyoptimizationtCheng

5、SiruiDirectedbyProfessorTUYishengAbstractThispaper,inthepreparationofprotoplastsoflongyaLilyenzymeandenzymesolutionsofdifferentconcentrationsonyieldofprotoplastsfromeffecttooneofthemostappropriatedataaswellasfetchinginprotoplastelectrofusionprocessinthedeterminationofthemo

6、stappropriatedata.Experimentalmainresultsareasfollos1bestconditionsforprotoplastoflongyaLily:enzymecellulase+1%1%composedofPectinase,besttimeis3.5hoursbyenzymatichydrolysis.2longyaLilyprotoplastelectrofusionthebestconditionsforthedurationoftheACvoltage6VDC50S300Vpulsetime:

7、25µspulse10timesKeywords:longyaLily,protoplast,enzymecomposedofprotoplastfusion201绪论百合是百合科百合属多年生草本球根植物，主要分布在亚洲东部、欧洲、北美洲等北半球温带地区。全球已发现有百多个品种，中国是其最主要的起源地，原产五十多种，是百合属植物自然分布中心。近年有不少经过人工杂交而产生的新品种，如亚洲百合、麝香百合、香水百合等。百合的主要应用价值在于观赏，有些品种可作为蔬菜食用和药用。本实验以龙牙百合为材料，研究酶液组成，酶解时间，这两个个因素对龙牙百合原

8、生质体制备的影响，以及百合原生质体电融合的最佳条件。1.1龙牙百合现状以及实验意义所在龙牙百合为江西省宜春市万载名产。万载百合有500多年的种植和加工历史，尤以龙牙百合在历史上久