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1、实验室常用配制之二2007-06-01 09:40:53大中小 六、核酸及蛋白质常用数据1.核苷三磷酸的物理常数化合物分子量λmax(pH7.0)1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值OD280/OD260ATP507259154000.15CTP48327190000.97GTP523253137000.66UTP484262100000.38dATP494259152000.15dCTP46727193000.98dGTP507253137000.66dTTP48226796000.712.常用核酸的长度与分子量核酸核苷酸数分子量λDNA48502(双链环
2、状)3.0×107pBR3224363(双链)2.8×10628SrRNA48001.6×10623SrRNA37001.2×10618SrRNA19006.1×10519SrRNA17005.5×1055SrRNA1203.6×104tRNA(大肠杆菌)752.5×1043.常用核酸蛋白换算数据 (1)重量换算 1μg=10-6g 1pg=10-12g 1ng=10-9g 1fg=10-15g (2)分光光度换算: 1A260双链DNA=50μg/ml 1A260单链DNA=30μg/ml 1A260单链RNA=40μg/ml (3)D
3、NA摩尔换算: 1μg100bpDNA=1.52pmol=3.03pmol末端 1μgpBR322DNA=0.36pmol 1pmol1000bpDNA=0.66μg 1pmolpBR322=2.8μg 1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿 1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿 1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿 (4)蛋白摩尔换算: 100pmol分子量100,000蛋白质=10μg 100pmol分子量50,000蛋白质=5μg 100pmol分子量10,000蛋白质=1μg 氨基酸的平均分子量=126.7道尔
4、顿 (5)蛋白质/DNA换算: 1kbDNA=333个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质 10,000MW蛋白质=270bpDNA 30,000MW蛋白质=810bpDNA 50,000MW蛋白质=1.35kb 100,000MW蛋白质=2.7kbDNA4.常用蛋白质分子量标准参照物(1)高分子量标准参照(2)中分子量标准参照(3)低分子量标准参照肌球蛋白分子量磷酸化酶B97,400碳酸酐酶31,00肌球蛋白212,000牛血清白蛋白66,200大豆脻蛋白酶21,500β-半乳糖甘酶B116,000谷氨酶脱氢酶55,000抑制剂 磷酸化酶B97,400
5、卵白蛋白42,700马心肌球蛋白16,900牛血清白蛋白66,200醛缩酶40,000溶菌酶14,400过氧化氢酶`57,000碳酸酐酶31,000肌球蛋白(F1)8,100醛缩酶40,000大豆脻蛋白酶21,500肌球蛋白(F2)6,200 抑制剂 肌球蛋白(F3)2,500 溶菌酶14,400 5.常用DNA分子量标准参照物λDNA/HindⅢλDNA/EcoRⅠλ/HindⅢ+EcoRⅠpBR322/HaeⅢ2313021226212275871239416742151484051046557580449735048943615643426845880232
6、2484335304346420273530202726757564 190423451125 158421321 137519218 97418411 8311247 564 125 续上表pBR322/HinfⅠφχ174/HinfⅠφχ174/HaeⅢφχ174/TapⅠ1631726140135329145177131181078117550655310087240439650082603327344417663102312984134828114122131142271872202494023454154200241943375151 1182
7、0 72七、常用凝胶的技术参数 1.葡聚糖凝胶的某些技术数据种类干颗粒直径(μ)分子量分级范围床体积毫升/克干分子筛得水值溶胀最少平衡时间(h)柱头压力(kPa)(2.5cm直径柱)肽及球形蛋白质葡聚糖(线性分子)室温沸水浴SephadexG-1040~120~700~7002~31.0±0.131 SephadexG-1040~120~150015002.5~3.51.5±3.531 SephadexG-25 粗级100~300 (≈5~100目) 中级50~150 (≈100~200目)1,000~
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