拟南芥筛库计划书

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1、首都师范大学本科生科学研究与创业行动项目立项申请书项冃类另壯一定向资助项目项目名称：通过酵母双杂筛选拟南芥CML24相互作用蛋白一项冃负责人：［王苏所在（院）系：生命科学学院项冃负责人电话：13621005681项目负责人信箱：439351846@qq.com指导教师：李怎攻指导教师职称：特聘教授指导教师单位：「首都师范人学生命科学学院首都师范大学填表日期:2014年4月8日填表说明1.写《申请书》前，请先查阅《首都师范大学本科生科学研究与创业行动项目管理办法（试行）》和相关通知。2.《申请书》各项内容，必须实事求是，表达要明确严谨，并要

2、求用钢笔填写（或打印）。对于填写不合要求、内容含糊不清、字迹潦草者,不予受理。3.上报的《申请书》一式八份（两份原件、六份复印件）。4.该《中请书》为A4纸，双面打印。项目信息项目名称与拟南芥CML24相互作用蛋白的筛选项冃类别及属性□…般项目□定向资助项目□延续资助项冃□指南类项EI□自选项13□创业项13项忖所属一级学科生物学以往项冃信息（延续资助项冃必填）项忖名称项目级别项冃负责人姓名联系方式学号项II指导教师姓名联系方式职称二、项目申请人情况项目负主贝人姓名王苏性别女学号1120800029所在院（系）生命科学学院专业、班级生物科

3、学、师范身份证号11022419940201384x电了邮箱439351846@qq.com联系电话及手机13621005681项目组其他成员姓名性别学号所在院（系）专业、班级联系电话手机邮箱身份证号分工签字姓名性别学号所在院（系）专业、班级联系电话手机邮箱身份证号分工签字姓名性别学号所在院（系）专业、班级联系电话手机邮箱身份证号分工签字姓名性别学号所在院（系）专业、班级联系电话手机邮箱身份证号分工签字指导教师姓名李乐攻性别男年龄51所在院系生命科学学院最终学历博士专业职称特聘教授职务联系电话68902593手机研究方向细咆^omg电子邮

4、箱lglil1242006@giRiil.com身份证号4301M196303052536三、申请人对研究项目简要说明（一）立项依据（项目的背景、理论与实际意义、国内外现状分析）钙（62+）信号涉及植物响应不同的刺激，例如触摸，光，病原体入侵，温度,激素以及二氧化碳。拟南芥（Arabidopsisthalianci）中的CM厶（calmodulin-like）基因家族编码的蛋白含有保守的钙结合结构域（EFhands）,是潜在的钙信号的传感器。拟南芥中CML24（TCH2）与CaM（calmodulin）具有44%的序列相似性，其基因表达受

5、到黑暗，伤害，高低温以及其他多种刺激的诱导。并且CML24的不表达会导致对外界离子浓度不敏感，对脱落酸刺激不敏感，以及在常日照下开花时间的延迟。而对其两个点突变突变体的（cml24・2Gly67Glu以及cml24-4Glul24Lys）研究主要集中在主根相应机械力，自噬进程以及免疫信号的研究。之前的研究主要是在描述其突变体的表型，并没有深入的涉及其参与钙信号的机理。CML24的缺失突变会导致众多的表形，说明其功能涉及到众多的钙信号途径，研究与其相互作用的蛋白可以揭示其参与哪条钙信号途径，使对其功能的本质有进一步的了解。（-）研究目标、内

6、容、拟解决的关键问题（包括实验方案的设计、技术路线等）通过酵母双杂的技术手段筛选拟南芥中与AtCML24互作的蛋白，借助实验室多年研究钙信号的基础了解CML24参与哪条钙信号途径，其互作蛋口中是否存在未知的钙离子通道。构建含有CML24全长基因的pGBKT7-CML24质粒一导入酵母菌株Y190-进行自激活检测一转入AD文库质粒一提取酵母质粒转入人肠杆菌扩繁一测序一进行点对点验证（三）硏究的进度安排4月・5月：了解CML24基因背景了解技术方法（阅读文献）6月・7月：准备实验材料6月・7月：提取拟南芥RNA逆转录并扩增CML24基因以及构

7、建pGBKT7-CML24质粒7刀月：pGBKT7-CML24转入酵母，自激活检验以及文库筛选。9月・10月：提取酵母质粒10月・11丿丄质粒扩繁并测序11W-12比对测序结果12月・（2015年）3月：进行点对点验证（四）成果形式:项冃成果形式研究报告的方式展示，并力争能够发表（五）项目创新特色概述（5（）字以内）作为一个潜在的钙信号感受器，本项目意在为深入研究CML24的功能打卜•基础。（六）中请人参加科研的经历（七）项目负责人承诺保证按期完成本项n的研究任务并提交各种验收材料。项目负责人签字：年月日（A）指导教师承诺同意担当木项H指

8、导教师并严格遵照相关管理办法，认真履行指导教师职责。指导教师签字：年月日四、申请资助金额和经费预算项冃经费共计（2000）元预算支出科目支出金额（元）预算根据及理由1.图书资料费1502.实验