聚六亚甲基胍消毒液杀菌效果及奶牛场应用观察

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1、聚六亚甲基弧消毒液杀菌效果及奶牛场应用观察2016-04-22张弦,张峥臻,张瑞华,张克春,上海市奶牛研究所【摘要】为了解聚六亚甲基呱的杀菌及奶牛场应用效果,采用琼脂杀菌试验选择奶牛场最低使用浓度,微量肉汤稀释法测定消毒液最低抑菌浓度(MTC),现场带畜消毒试验,奶牛粘膜刺激试验和消毒液抗生素残留检测试验。结果表明聚六业甲基弧在实验室针对奶牛场所分离的人肠杆菌和葡萄球菌的最低抑菌剂量分别为0.125%和0.0625%,因而推荐奶牛场最低使用浓度为0.2%;带畜消毒时动物并无排斥行为;将推荐最低使用浓度的消毒液

2、涂抹于奶牛鼻粘膜、阴道粘膜、乳房,并无过験等界常反应发生;当聚六亚甲基弧浓度大于0.02%时,抗生素检测为阳性;当其浓度小于0.002%时,抗生素检测为阴性。【关键字】聚六亚甲基脈;杀菌效果;MTC:带畜消毒聚六亚甲基脈(PHMG),为一类环保型高分子聚合物杀菌剂,其性能优越,具有高效、安全、稳定、无刺激性等特点。聚六亚甲基脈中的呱基溶于水后带正电荷,易吸附在带负电荷的微生物表面,并几能渗透到微生物休内,破坏微生物体的细胞结构和能量物质代谢,使细菌和病毒丧火了活性。同时,聚合物形成的薄膜将会堵塞微生物的呼吸通

3、道,使微生物迅速窒息而死广,从而起到杀菌的作用。基于这一作用机理,病原微牛物不易产生耐药性,因此,聚六亚甲基弧在纺织、水产养殖、洗手液等行业应用较为广泛,但在畜禽养殖业方而的应用较少。为观察该消毒液杀菌效果和奶牛场应用效果,在实验室和奶牛场分别进行了试验观察。本试验所使用的聚六亚甲基脈溶液的含量为25%o一、材料与方法1.1消毒剂和试验菌本试验所用消毒液由上海特龙牛•物科技发展有限公司提供,聚六亚甲基脈的含量为25%。本次试验所用菌种为从上海地区某奶牛场采集的人肠杆菌和葡萄球菌,经稀释液配制成试验菌悬液备用。

4、1・2琼脂杀菌(抑菌试验)用去离子灭菌水将消毒液稀释成不同的浓度(1%、0.5%、0.25%、0.125%、0.063%、0.031%、0.016%)0取两块血平板用接种环挑取人肠杆菌和葡萄球菌分别作致密划线。将不同浓度的消毒液滴加10u1于琼脂表而,不同浓度的消毒液排布方式参考药敏试验不同的药敏纸片排布。置37°C培养24h后观察消毒液覆盖范用内细菌生长悄况,完全无细菌生长的最低浓度推荐为最低使用浓度。1.3微量肉汤稀释法测定MIC试验取一块96孔板,在每孔中加入含TTC的灭菌营养肉汤1OOulo在A/B/

5、C/D/E/F六排的第一孔内加入有效浓度为5%的消毒液lOOul,然后对消毒液进行二倍稀释。即第一孔屮加入消壽液后用移液枪充分吹打(至少5次以上)使消壽液与肉汤充分混匀,然后吸取100P1加入第二孔再吹打使Z与肉汤充分混匀,照此重复直至最后一孔,吸取1OOP1弃去;此时前六排每孔消毒液有效成分稀释度从左至右依次1:40,1:80,1:160,1:320,1:640,1:1280,1:2560,1:5120,1:10240,1:20480,1:40960,1:81920。在A/B/C三排屮每孔加入5p1大肠杆菌

6、悬液,在D/E/F三排中加入5卩1葡萄球菌悬液。在G排前六孔加入5»1人肠杆菌悬液,后六孔加入5P1葡萄球菌悬液,作为阳性对照。H排不加肉汤以外其他任何物质,作为阴性对照。置37°C恒温培养箱培养18~24h后观察,若有细菌生长TTC会显示红色;若没有细菌生长TTC则不变色。前六排中耒变红色的戢后一孔所对应的浓度便为消毒液的MTC值。2.4奶牛场带畜消毒试验随机选样奶牛场奶牛的一个区(每个区平均分为两块区域,两个区域Z间牛只可以H由活动),选择其中一个区域,进行喷洒消毒(消毒液浓度为以上试验所得推荐最低使用浓

7、度),消毒范围包括空气、卧床和栏杆。观察奶牛行为有无异常,是否愿意在这一区域内活动,有无排斥反应。2.5粘膜刺激试验在奶牛场随机选择8头奶牛,保定后用棉签蘸取推荐使用浓度的消壽液,涂抹于奶牛鼻粘膜、阴道粘膜以及乳头表而,五分钟后观察奶牛有无过敏或其他界常反应。2.6消毒液抗生素残留检测取6个ECLTPSE50(E50)抗生素检测试剂单孔,使用牛奶将消毒液稀释到0.2%、0.02%、0.002%、0.0002%的有效浓度,取50»1加入到检测孔中,剩下两孔分别做阴性对照(加入无抗奶)和阳性对照(lOppb青霉素

8、样品)o密封后将检测孔放入65°C水浴锅中,培养2小时30分钟。反应结束后取出检测孔从侧而观测孔中颜色,记录结果。判读标准:黄色到浅黄色包插绿色为阴性结果范围;蓝绿色到紫色为阳性结果范围。二、结果2.1琼脂杀菌(抑菌试验)结果消毒液在稀释到0.125%时,其覆盖范围内大肠杆菌完全不牛:长,在0.0625%范围内有少量生长,之后的稀释度牛长良好。结果表明该消毒液对大肠杆菌的有效杀灭浓度应在0.125%

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