试析中药薄层色谱指纹图谱方法学基础研究

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1、四川大学硕士学位论文中药薄层色谱指纹图谱方法学基础研究姓名：刘珍申请学位级别：硕士专业：应用化学指导教师：梁冰20050501’旷7"／9429㈦川大学坝斗‘学位论文。中药薄层色谱指纹图谱方法学基础研究应用化学专业研究生刘珍指导教师梁冰由于中药成分的复杂性，长期以来，中药从原材料到产品缺乏被国际认可和接受的客观、明确、严格的质量标准和规范，制约了中药的产业化、国际化。所以中药的质量评价与控制工作己成为迫不及待的研究任务。近十年来，中药指纹图谱正逐渐被世界公认为是能较全面综合地把握和控制中药或天然药

2、物质量的有效手段。色谱法是构建中药指纹图谱的主要技术，目前的研究更多的集中在使用HPLC，而天然药物分离分析的传统、简便、经济的方法——薄层色谱在中药指纹图谱的研究、应用及方法学讨论都十分有限。因此，本文研究探索以办公扫描仪／数码相机+数字图像处理为检测技术基础的薄层色谱检测技术运用于中药指纹图谱研究的可行性，旨在探索一条适合中国国情的中药质量评价与控制技术之路。本文以菟丝子、鸡血藤、女贞子、银杏叶为对象，从下列各方面进行了中药薄层色谱指纹图谱方法学的基础研究：研究了运用办公用扫描仪／数码相机+数

3、字图像技术获取准确、可靠的薄层色谱图像并数字化为薄层色谱曲线的方法，影响精密度与重现性的因素，考察了上述方法获得的指纹图谱与CAMAG薄层色谱扫描仪之结果的相似程度。用办公扫描仪获得的女贞子可见薄层色谱积分曲线，与cA姒G扫描仪得到的结果最为一致。用数码相机在366nm紫外光下获得的鸡血藤、银杏叶的荧光／荧光猝灭薄层色谱图像，以图像处理技术得到的结果与CAMAG薄层扫描仪所得的结果接近。其中鸡血藤用硅胶G板展开得到的荧光色谱，用图像处理技术得到的峰数比CAMAG薄层扫描仪得到的峰数更多。实验证明，

4、用图像处理技术获取薄层色谱指纹图谱，可处理荧光／荧光猝灭／可见薄层色谱，与专业薄层扫描仪获得的结果相近，仅在一些分离较差的肩峰的辨认上略为逊色。中药溥层色谱指纹图谱方}土学培础研jE通过硅胶薄层板传统有机展开剂、聚酰胺薄膜一微乳液展开剂的研究与比较，进行了色谱固定N／展开剂体系优化的方法学研究。将微乳液展开剂应用r银杏叶及其制剂指纹图谱，结果与普通有机展开剂相比，斑点集中程度和荧光强度均有提高。并将均匀设计法应用于合理安排实验，快速寻找最佳展开剂比例上，取得了很好的效果。研究建立了菟缝子、鸡血藤、

5、女贞子、银杏叶及银杏叶注射液的薄层色谱分离分析方法，及基于办公扫描仪／数码相机+数字图像处理技术为检测技术基础的薄层扫描色谱指纹图谱。菟丝子、鸡血藤、女贞子在硅胶薄层板内展开均可得到卜多个斑点，银杏叶及银杏叶注射液在聚酰胺薄膜一微乳液展开剂的色谱体系中得到10个共有峰，均得到良好分离。用相似度参数考察了鸡IlIL藤、女贞子不同市售品间的异同，所得指纹图谱相似度均在0．9以上，符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的要求。研究证明，采用我们的数字图像处理技术建立薄层色谱指纹图谱的方法，所需

6、设备廉价，方法简便快速，样品前处理简单，可同时处理大量样品，不但能提供直观的斑点颜色信息，还能提供薄层色谱积分曲线，以及进行相似度计算和评价，有着其它色谱分析方法所不具备的特色，尤其适宜于GAP基地生产与质控需要，可作为中药质量控制的参考方法。关键词：图像处理薄层色谱指纹图谱四川人学硕士学傅论殳一————————————————————————————————————————————一TheMethod0109icalStudyinConstructionofTLCFingerprintsofCh

7、ineseMedicineMajor：AppliedChemistryPostgraduate：LiuZhensupervisor：LiangBingChineseMediCineislackofclear，objectiveandinternational1yacceptedstandardforrawmaterialsandproducts，duetoitscomplexity．Itsindustria]izationandinternationalizationare1imited．Henc

8、ethestudyinitsqualityassessmentandcontrolisveryessential．Inthesetenyears，fingerprinthasbecomeaworldwide—recognizedeffectivetechniqueforChineseMedicinequalitycontr01．Fingerprintmainlyuseschromatogram，especiallyHPLC，asitsconstructiontechnique，wh