微环境诱导ipscs和bmscs向神经元样细胞分化-reelin对细胞分化和极性化的调节作用

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2、nmentsinducingiPSCsandBMSCsintoneuron-likecells--Reelin’sregulativeroleoncelldifferentiationandpolarizationADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByFuSuSupervisor:Prof.

3、DengJinboApril,2015关于学位论文独创声明和学术诚信承诺本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在此本人郑重承诺：所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负。学位申请人

4、（学位论文作者）签名：201年月日关于学位论文著作权使用授权书本人经河南大学审核批准授予硕士学位。作为学位论文的作者，本人完全了解并同意河南大学有关保留、使用学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文（纸质文本和电子文本）以供公众检索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文（纸质文本和电子文本）。（涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书）学位获得者（学位论文

5、作者）签名：201年月日学位论文指导教师签名：201年月日摘要目的：研究小鼠诱导性多能干细胞（inducedpluripotentstemcells,iPSCs）和小鼠骨髓间充质干细胞（Bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs）在大脑微环境的诱导下向神经元样细胞分化的过程；尤其是探讨细胞极性的关键分子Reelin蛋白对干细胞分化的影响。方法：将iPSCs和BMSCs分别与WT和Reelin缺失小鼠（reeler小鼠）的海马脑片以及两种小鼠的脑匀浆上清共培养，观察二者在脑片

6、微环境下的细胞分化和极性化改变，揭示Reelin蛋白对细胞分化和极性化的影响。结果：与WT和Reeler小鼠脑片共培养的iPSCs和BMSCs均出现神经元样细胞的分化。二者在WT小鼠海马脑片呈双C字型海马片层化分布，同时表现出很强的方位性；而与reeler小鼠海马脑片共培养的细胞分布则无明显规律性，呈均匀分布。此外，与脑匀浆上清培养基共培养的iPSCs和BMSCs，在共培养72小时后，部分类神经元样细胞可以被神经干细胞标记物（Nestin）和神经元特异标记物（NeuN）所标记，表明他们可以分化成为功能性

7、神经元。且在共培养初期reeler微环境培养基中神经元分化和突起生长相对滞后。结论：在大脑微环境的诱导下，iPSCs和BMSCs可以向神经元样细胞，甚至功能性神经元分化，Reelin蛋白参与了细胞极性化过程，Reelin缺乏可造成神经细胞极性紊乱，并对神经元分化及突起生长有一定影响。关键词：诱导多能干细胞，骨髓间充质干细胞，Reelin蛋白，大脑微环境，细胞分化，细胞极性化IABSTRACTObjective:Thepresentstudyaimstoinvestigatehowtheinducedpl

8、uripotentstemcells(iPSCs)andbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)differentiateintoneuron-likecellsundertheinductionofhippocampalmicroenvironmentsandReelin’sregulation.Methods:iPSCsorBMSCswereco-culturedwithWT(wildtype)orga