同种异体胎兔bmscs为种子细胞构建组织工程骨的实验研究

《同种异体胎兔bmscs为种子细胞构建组织工程骨的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号Ｒ６密级公开？ＵＤＣ６１０学校代码１０５巧腳＠杂孝义索硕：ｔ学位论文（专业学位）同种异体胎兔ＢＭＳＣｓ为种子细胞构建组织工程胥的实验研究研究生姓名；周权指导教师、职称：周晓教授专业学位类别（领域）：临床医学外科学（）研究方向：组织工程．所在学院：湖南省肿瘤医院—，二〇：；五年五月１．．Ｖ．＇■ｉ■■Ｉ■■ｉ同种鼻休胎免ＢＭＳＣｓ为种子细胞柏建组织工程賞巧实验巧究论文作者签名：＿巧私指导教师签名：巧化论文评阅人１：曾勇，助理研究贵，硕导，

2、中南大学２：谢辛，副丰化睽师，硕导，中南大学湘雅医院评阅人答辩委员会主席：梁剑平，主任医师，硕导，中南大学湘雅医院－，委员１；喻津军，主任医师硕导，中南大学湘雅医院Ｉ委员２，韦任医师，硕导，中南大学湘雅医院＿；李替委员３；谭国林，主任医师，博导，中南大学湘雅王睽院硕导’４，教授，南华大学委员：雷小勇，委黄５；委员６；答辩日期；２０１５年５巧１５Ｎ南华大学学位论文原创性声明本人芦明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进巧的研究Ｌ作妓取巧的研究，｜成果。尽我所知，除了论文经｜特别加标注和致谢的地方外，论文中不包

3、含其他人已发表或撰写过的硏究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共时工作的村志对本硏究所作的贡献均Ｇ在论文中作了明满的说明。本人完全息识到本声明的法律结果由本人承担。作者蒋名；ｉｈ；：Ｔ月百ｊｊ南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（悼／硕）±学化期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研矜成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得ｌｉｔ其它单位的名论义发表。本人同意南伴大学有关保留、使用学位论文的规定，即；学校巧权保留学位文，允许学位论文被查昭和借阅；学校可ｔＵ公布巧位论文的全部或部分内容

4、，可Ｗ采用复印、缩印或其它手段保留入学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学巧论文。同意学校将论文加《中巧优秀博硕±学位讫文全文数据库》，并按《中国优秀博硕＋学位论文全文数据阵出版章程》规定亨巧化关权益。同意授权中国科学倍息技术研究所将本学位论文收录到《中国学巧论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者盜名年ｒ月（句１导师签名；巧＇ＴｉＪ技同种异体胎兔BMSCs为种子细胞构建组织工程骨的实验研究摘要：骨缺损在临床上的整复治疗备受关注。传统自体骨移植具有不可避免的二次损伤并且伴随着感染、疼

5、痛等风险的可能。人工骨代用品成骨性低、个体差异性大，并且还存在因其抗原性引起的体内长期排斥与降解速度慢造成的异物反应等缺点。组织工程骨有望成为临床修复下颌骨缺损的理想替代品。目的：探索建立以同种异体家兔胎龄期骨髓间充质干细胞为种子细胞构建组织工程骨的可行性。方法：通过人工受精方法，获得孕期3周的孕兔1只，行剖腹产术取出胎兔7只，冲取胎兔骨髓以贴壁培养法进行体外扩增培养。另16只成年新西兰大白兔无差别分为实验组与空白材料对照组，各8只。6取P3代胎龄期BMSCs以20×10cells/ml的浓度接种DBM继续培养诱导。用经诱导的BMSCs-DBM修复实验组家兔桡骨1.5cm节段缺损，

6、用空白DBM材料按同样手术方法修复空白对照组家兔。术后不同时间进行随访与X线观察。术后12周两组家兔均实行空气注射栓塞致死，行取材后大体观察、Micro-CT影像学检测、组织学染色等检测指标评价修复效果。同时对胎龄期家兔BMSCs行相应数据检测，测量P3代胎兔骨髓间充质干细胞的生长曲线，克隆形成率，并进行成骨、成脂及成软骨诱导分化。另外将原代细胞冻存后30天复苏，测量其P3代生长曲线，对冻存前后增殖能力的变化进行观察。扫描电镜观察胎兔骨髓间充质干细胞与DBM形成细胞材料复合物的体外形态。将IBMSCs-DBM复合物植入裸鼠皮下，于术后1、3、6月分别取材行HE、VG、Masson染

7、色观察。结果：胎兔来源的骨髓间充质干细胞倒置相差显微镜下观察细胞饱满均匀，呈梭形或倒三角形状；传代后各代细胞形态未发生明显变化，生长曲线相差不大；成骨、成脂以及成软骨诱导观察到钙结节、脂肪空泡、黏多糖。冻存30天后复苏，其P3代生长曲线与冻存前相比未见明显变化。电镜下观察，与DBM复合7天后细胞能均匀紧密贴合于材料上，伸展良好分布均匀。植入裸鼠皮不同时间点取材进行HE、VG、Masson染色，均显示有新生骨组织生成。诱导BMSCs-DBM植入缺损后通过X线发现阻摄影不