柚皮甙诱导bmscs复合生物衍生骨构建组织工程骨的实验研究

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1、学校代码：10600学号：093024学位类型：科学学位广西中医药大学硕士学位论文柚皮甙诱导BMSCs复合生物衍生骨构建组织工程骨的实验研究研究生：罗道明导师：杨渊教授院系（部所）：瑞康临床医学院专业：中医骨伤科学研究方向：骨与关节软骨损伤与修复的实验研究完成日期：2012年4月10日目录主要缩略词…………………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………………2英文摘要……………………………………………………………………4引言……………………………………………………………

2、………7正文……………………………………………………………………9第一部分生物衍生骨材料的制备……………………………………….91实验目的…………………………………………………………………92实验对象…………………………………………………………………93实验试剂…………………………………………………………………94实验仪器…………………………………………………………………95实验方法…………………………………………………………………116统计学分析………………………………………………………………177实验结果………………

3、…………………………………………………178讨论………………………………………………………………………21第二部分柚皮甙诱导骨髓间充质干细胞复合生物衍生骨异位构建组织工程骨的实验研究…………………………………………………………301实验目的…………………………………………………………………302实验对象…………………………………………………………………303实验试剂…………………………………………………………………304实验仪器…………………………………………………………………315实验方法………………………………………

4、…………………………316实验结果…………………………………………………………………337讨论………………………………………………………………………35存在问题与展望……………………………………………………………40结论……………………………………………………………………42参考文献……………………………………………………………………43附录……………………………………………………………………52综述……………………………………………………………………58致谢……………………………………………………………………69攻读学

5、位期间发表的学术论文目录………………………………………70广西中医药大学研究生学位论文作者声明………………………………71个人简历……………………………………………………………………72主要缩略词Abbreviationandacronyms英文缩写英文全称中文全称BMSCsBonemarrowmesenchymstemcells骨髓间充质干细胞BDBBio-derivedbone生物衍生骨ALPAlkalinephosphatase碱性磷酸酶FBSFetalbovineserum胎牛血清DMSODimethylsulf

6、oxide二甲基亚砜ODOpticaldensity光密度PBSPhosphatebuffersolution磷酸盐缓冲液PProbability概率EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸DMEMDulbecco’smodifiedEagle’smediumD氏改良Eagle培养基HEHmeatoxylinandeosin苏木素一伊红SPSSStatisticalPackageforSocialScience社会科学统计软件包TCCriticaltemperature临界温度PC

7、Criticalpressure临界压力SCF/SFSupercriticalfluid超临界流体SC-CO2SupercriticalCO2超临界二氧化碳SFESupercriticalfluidextraction超临界流体萃取1中文摘要目的：（1）利用改良法制备廉价易得、生物相容性好的生物衍生骨材料。（2）对生物衍生骨材料在体内的降解性及异位成骨能力进行评价，为生物衍生骨作为骨组织工程支架材料的研究提供实验依据。（3）检测柚皮甙体外诱导成骨能力，为其成为新药提供理论支持。方法：选用5月龄新西兰大白兔双侧髂骨，采用双

8、氧水脱蛋白、超临界CO2法脱脂、超声波清洗、深低温冷冻后，制成5mm×5mm×3mm大小的生物衍生骨支架材料，对其理化性质及生物相容性进行检测；采用全骨髓贴壁法获得新生兔的骨髓间充质干细胞，收集纯化、传代培养5后第三代骨髓间充质干细胞，以5×10/ml的浓度接种到生物衍生骨材料上，CO2培养箱中孵育4小时后，加入柚皮