中药复方银屑1号对hacat细胞的炎症调控及对ne、trappin-2的影响

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1、分类号R275学巧代号1057220121101037UD0610巧级公升学号''h'■抑中li為乂嗦(、-.一'—GuangzhouUniversityofChineseMedicine硕±学位论文'.户:?'■—中药复方银屑1号对HaCat细胞的炎症NE-2调控及对、trappin的影晌\学位申请人杨丽红指导教师姓名—^专业名称中屋外科学申请学位类型专业学位论文提交日期2015年5月广州中医药大学学位论文原创性声明:所呈交的学位论文,独立进

2、行研究工本人郑重声明,是个人在导师的指导下。作所取得的成果除文中己经特别加W注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果,均。对本文的研巧做出重要贡献的个人和集体己在文中W明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名■曰期;Jwj年月20曰关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部n机构送交论文的复印件和电子版,允许被査阅和借阅。本人授权广州中医药大学可W将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可采用影

3、印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名论文导师篇名*曰期-;之wi年j月三口曰?摘要目的:银屑病为皮肤科常见的慢性炎症性疾病,其主要病理特征是角质形成细胞(keratinocytes,KC)的过度增殖及中性粒细胞(polymorphonuclearneutrohilsPMNs)的聚集。PMNs合成、储存的中性粒细胞弹性蛋白酶p,(neutrohilelastase,NE)成为目前研究的焦点问题Ep。N具有加速炎症反应、促进细胞增殖,、导致组织损伤等作用对银屑病的发生发展

4、起到关键性的作用。t-rappin2是肥的内源性抑制剂,常表达于某些炎症性皮肤病及皮肤肿瘤中,通过降解肥来抑制NE活性。主要由KC分泌,亦是KC分化的标志性蛋白。目-前,关于肥/trappin2平衡失调的致病学说己经得到广泛的认可。人永生化角质细胞(HaCat细胞)与KC的基本特性极其相似,己广泛应用-a于银屑病的研究中。本文应用体外培养的经肿瘤坏死因子(Tumornecrosisfactor-at,TNF)刺激的HaCa细胞模拟银屑病的病理特征,通过不同浓度中药Ca-2复方银屑1号的含药血清作用于Hat细胞,观察其对肥、trappin及

5、相关细化-6--1-胞因子(、化8、ICAM等)表达的影响,W探讨NE、trappin2在银屑病发病中的作用机制,阐明中药复方作用于银屑病的内在物质基础,为中药复方治疗银屑病新的作用靴点提供更有巧的科学依据。方法:实验设置不同浓度的中药复方组、雷公藤阳性对照组及生理盐水组,并制备各组含药血清。将体外培养的HaCat细施接种于96孔板内,待细胞铺满孔底TNF-a时,,将各组的含药血清加于培养板中;各孔均加入同量的刺激进行培养-分别在Oh、12h、24h、4加不同的时间点,采用ELISA法检测NE、trappin2、--tern--IL6、化

6、8水平,Wesblot法检测ICAM1的表达水平。结果:1、NE实验结果显示:12h时银屑1号原液组与银屑1号1/2浓度组比较有统计学意义(尸<0.05);银屑1号1/2浓度组各时间点比较,Oh的肥浓度最高,1化最低,12h与Oh、24h、4化相比均有统计意义(戶<0.05);2tr-in2、a实验结果示:银屑1/2浓度组、银屑1号1/4浓度组与其他pp组比较有统计学意义(户<0.05);银屑1号1/4浓度组组内Oh、12h、24h、48ha-组间两两比较有统计学意义(P<〇.05),且化时trppin2浓度最低48h,时-trapp

7、in2浓度最高;IL-13、6实验结果示:银屑号1/4浓度组与其他组比较有统计学意义(戶<0.05),且组内Oh与12h、4加有统计学意义(戶<0.05);14-、IL8实验结果示:银屑1号1/4浓度组与其他组比较有统计学意义<0.05),且组内12h与Oh、24h有统计学意义(片<0.05);5、WB实验结果显示:各组间均无统计学意义(/>0.05)。结论;-1、NE、train2中药复方作用于pp并不是随着浓度的变化而变化;中药复方银屑1/2浓度组12h时抑制NE的表达

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