二烯丙基二硫诱导大鼠肝星状细胞hsc-t6凋亡的作用及机制

《二烯丙基二硫诱导大鼠肝星状细胞hsc-t6凋亡的作用及机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号Ｒ５７密级公开ＵＤＣ６１０学校代码１０５日日Ｊ－；户＠為孝＾拿专．硕ｄｒ学位论文＾巧业学位）二婦巧基二硫诱导大鼠肝星状细胞ＨＳＣ－Ｔ６調古的作用及机制研究生姓名；唐美英指导教师姓名、职称：王正根副教授学科专业：临床医学（内科学）研究方向：肝纤维化防治所在学院：南华大学附属第二医院二〇—五年五月＇Ｉ義＃＾攀论文题目二踩丙基二硫诱导大鼠肝星状细胞ＨＳＣ－Ｔ６網亡的作用及机制论文作者签名；ｉ芝ｐ指导教师签

2、名：论文评阅人１：张秉强教授评阅人２；曾珍副研究员评阅人３：答辩委员会主席：张明亮教授委员；１张測教授委员２；李国庆教授委员３；周国华教授委员４；钟大志副教授委贡５；答辩日期：２０１５年５月９日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加标往和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学

3、或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承。担作者签名；ｒ方日月南华大学学位论文版枚使用授权书（博／硕）本学位论文是本人在南华大学攻读±下题学位期间在导师指导完成学论１论。，论文的位文本文的研究果归华的研不＾其成南大学所有本究内容得它单位的名义发表。本人同意南华大有保、，即；学学关留使用学位论文的规定校有权保留学位论文，允许学位论文彼查阅和借阅；学校可公论文全布学位的、，可Ｗ

4、部或部分内容采用复印缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家位论。或湖南省有关部规定送交文同入±口学意学校将论文加《中国优秀博硕学位论文全文数》，《国硕±学论全文》据库并按中优秀博位文数据出库版章程规。益同定享受相关权意授权中国科学信息技术研究所将本学论收《中位文录到国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众供信服。对于提息务涉密的学位，解。论文密适权后用该授者签■名兴作年月对日签；月日导师名＾，二烯丙基二硫诱导大鼠肝星状细胞HSC-T6凋亡的作用及机制摘要目的：观察二烯

5、丙基二硫（DADS）在体外对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）凋亡的影响，并探讨DADS是否通过抑制bcl-2、促进bax的表达来诱导细胞凋亡，从而起抗肝纤维化作用。方法：1.分别用不同浓度的DADS（0、50、100、200、400、800μmol/L）处理HSC-T6细胞不同时间（24、48、72h）后，CCK-8法检测DADS对细胞的增殖抑制作用，得出最适浓度范围及作用时间，并根据此结果调整后续实验的药物浓度及作用时间；2.光学倒置显微镜观察细胞形态后，Hoechst33342染色法观察细胞核凋亡形态学变

6、化；3.流式细胞术检测细胞周期（PI单染法）和细胞凋亡率（Annexin-FITC/PI双染法）；4.分别用WesternBlot及免疫细胞化学法检测不同浓度DADS对Bcl-2、Bax表达的影响。结果：1.DADS对HSC-T6体外增殖抑制作用明显，呈浓度依赖性，并得出药物作用48h后效果最佳，其IC50为292μmol/L，调整后续实验药物浓度为0、150、300、600μmol/L；2.DADS能引起细胞学形态显著变化。光学倒置显微镜下可见药物组细胞贴壁不均匀，缩小呈类圆形，胞核固缩，部分细胞碎裂成片

7、，且随着浓度增加，形态改变更明显；3.DADS能阻滞细胞周期于S期：随药物浓度的增加，G0/G1期、G2/M期细胞比例减少，而S期细胞比例明显增加，提示细胞周I期阻滞于S期；4.DADS能促进细胞凋亡：①Hoechst33342染色后荧光显微镜下可见胞核呈凋亡形态学改变，表现为核固缩呈强蓝色荧光致密团块、染色质浓缩边聚向核膜靠拢形成半月形、部分细胞发生核碎裂、凋亡小体形成等；②流式细胞术检测到细胞凋亡率与DADS作用浓度呈正相关；5.免疫细胞化学法与WesternBlot法均证实药物组Bcl-2较对照组表达

8、减弱，而Bax表达增强。结论1.DADS能显著抑制HSC-T6体外增殖；2.DADS可明显诱导HSC-T6凋亡，其机制可能与减弱bcl-2、增强bax的蛋白表达相关。3.DADS可能通过抑制HSC-T6增殖与诱导其凋亡，从而起抗纤维化作用。关键词：二烯丙基二硫；大鼠肝星状细胞；凋亡；Bcl-2；BaxIIAPOPTOSISINDUCEDBYDIALLYLDISULFIDEINRATHEPATICSTELLATEC