七氟烷预处理联合后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤核转录因子κb表达的影响

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1、分类号：R614.2密级：公开学号：2012409149单位代码：10759石河子大学硕士学位论文七氟烷预处理联合后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤核转录因子κB表达的影响学位申请人刘备指导教师徐桂萍申请学位类别临床医学硕士专业名称临床医学研究领域麻醉学所在学院医学院中国〃新疆〃石河子2015年6月EffectsofsevofluranepreconditioningandpostconditioningonactivityofNF-κBduringlungischemiareperfusioninratsADissertationSubmittedtoSh

2、iheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofDoctorofMedicineByLiuBeiSupervisor:XuGuiPingJune,2015石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。研究生签名：时间：年月日使用授

3、权声明本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日摘要目的：探讨七氟烷预处理联合后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤核转录因子κB表达的影响，从而为七氟烷联合作用的器官保护作用奠定理论基础。方法：选择新疆医科大学动物实验中心提供的健康、清洁级、雄性SD大鼠54只，体重在

4、300～350g之间，按照多个样本均数比较的样本含量计算公式估算出本研究所需大鼠共54只，每组18只。按照随机数字表法随机分为3组（n=18）：假手术组(S组)：大鼠进行腹腔注射麻醉后仰卧位固定，游离右侧颈总静脉，行深静脉置管，并持续泵入0.9％氯化钠注射液，同时游离大鼠气管，行气管切开并进行气管插管，接小动物呼吸机行机械通气，通气频率65-70次/min，潮气量10~15ml/kg，呼吸比1.0∶1.5。呼吸机的进气口与装有七氟烷挥发罐的麻醉机呼吸回路末端相连。通气30min后，大鼠行右侧卧位，并在大鼠左侧第5肋间进胸，应用钝性分离离断左下肺韧带，游

5、离左肺门，并应用在0.9％氯化钠注射液中浸泡过的湿纱布覆盖所暴露的肺组织制备S组模型；肺缺血再灌注组(I/R组)：采用同S组模型同样模型制备方法对大鼠肺组织进行暴露，同时于颈总静脉注射肝素钠50U进行大鼠血液肝素化。注射肝素钠5min后，于大鼠呼气末采用无创血管对所游离出的大鼠左肺门进行夹闭，夹闭后进行观察，通气时肺组织不再膨胀，颜色由淡红色变为暗紫红色，表明肺门阻断成功。在大鼠肺门阻断45min后，松开血管钳恢复大鼠肺组织的血液循环和通气，形成肺组织的再灌注，并进行观察。5min内大鼠肺组织与通气时膨胀，且肺组织颜色逐渐恢复成再灌注之前的颜色，表明大

6、鼠肺组织的再灌注成功，大鼠肺组织再灌注的模型制备成功；七氟烷预处理联合后处理组(SP组)：在对大鼠左肺门进行阻断前前吸入2.1％七氟烷30min，洗脱10min，然后阻断左肺门45min，并于形成再灌注的即刻再次吸入七氟烷30min，以此制备七氟烷联合处理组的模型。并分别于再灌注30、60和120min时随机处死6只大鼠，取大鼠肺组织，测定大鼠肺组织湿重/干重比值(W/D比值)，采用ELISA法测定大鼠肺组织TNF-α含量，采用RT-PCR法测定大鼠肺组织NF--κBp65mRNA的表达并采用Westernblot法测定核蛋白NF-κB活性的表达，同时

7、光镜下观察肺组织病理学结果，对大鼠肺组织损伤情况进行评价。结果：与S组比较，I/R组和SP组再灌注各时点肺组织W/D比值、TNF-α含量、NF--κBp65mRNA及NF-κB活性均升高(P<0.05)；与I/R组比较，SP组再灌注各时点肺组织W/D比值、TNF-α含量、NF--κBp65mRNA以及NF-κB活性均降低(P<0.05)，且病理学提示七氟烷联合处理组的大鼠肺损伤较缺血再灌注组减轻。结论：七氟烷预处理联合后处理可通过降低肺组织NF-κB活性的表达，减轻大鼠肺缺血再灌注损伤。关键词：七氟烷；预处理；后处理；肺再灌注损伤；NF-κBIAbst

8、ractObjective:Toexploretheinfluencesofsevoflura