胰岛素原乳腺特异表达转基因细胞和转基因小鼠模型的制备

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4、ＦＥＣＴＥＤＣＥＬＬＳＡＮＤＴＲＡＮＳＧＥＮＩＣＭＩＣＥＦＯＲＰＲＯＤＵＣＩＮＧＨＵＭＡＮＰＲＯＩＮＳＵＬＩＮ学院：生命科学学院专业：动物学研究方向：生殖生物学与生物技术姓名：吴晨辰指导教师：吴俠副教授２０１５年５月２９日原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除本文已经注明引用的内容外，，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果也不包含为获得内蒙古大学及其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同。与我志对本研究所做的任何贡献均

5、已在论文中作了明确的说明并表示谢意。、学位论文作者签名：指导教师签名：对ｒ日期？：７＾Ｉ日期：在学期间研宄成果使用承诺书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：内蒙古大学有权将学位论文的全部内容或部分保留并向国家有关机构、部门送交学位论文的复印件和磁盘，允许编入有关数据库进行检索，也可以采用影印、縮印或其他复制手段保存、汇编学位论文。为保护学院和导师的知识产权，作者在学期间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使用涉及在学期间主要研究内容或研宄成果，须征得内蒙古大学就读期间导师的同意；若用于发表论文

6、，版权单位必须署名为内蒙古大学方可投稿或公开发表。、、学位论文作者签名：指导教师签名：／免、日期：＞１＾“日期：／Ｉ内蒙古大学硕士学位论文人胰岛素原乳腺特异表达转基因细胞和转基因小鼠模型的制备摘要利用非胰岛细胞生产胰岛素一直生物合成胰岛素研宄领域的Ｐ热点，胰岛素原在胰岛Ｐ细胞中主要通过ＰＣ１／３，ＰＣ２和ＣＰＨ三种酶加工成有活性的胰岛素。研宄发现，ＰＣ１／３酶在哺乳动物乳腺细胞中广泛表达。－本研宄合成了两条经过修饰得人胰岛素原基因，Ｓｅｑ６６２、Ｓｅ－７９２－ｑ，以及未经过修饰的胰岛素原基因，Ｓｅｑ６６

7、３。构建乳腺特异－－ＰＢＣ－１－－－表达载体６６２、６６３ＰＢＣ１、７９２ＰＢＣ１。利用人乳腺癌细胞系，ＢＣＡＰ－３７制备转基因细胞，分离单细胞来源细胞６５株，其中携带外－－２３６６２－Ｂ４４２源基因的细胞株。选取其中的、６６３和７９Ｆ三株进行诱导、刺激人胰岛素原基因的表达显示，在相同诱导时间内，不同转基因细胞中人胰岛素原基因的表达，随着葡萄糖剌激浓度的不断增加，但是不同细胞对于葡萄糖的反应存在不同。综上所述，本研究构建了２个修饰的人胰岛素原乳腺表达载体，并且检测发现，他们能够在细胞和个体水平很好的诱导表达人胰岛素原基因。这将为

8、今后在大动