尼古丁在腹主动脉瘤形成中的作用及分子机制研究

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1、上海交通大学硕士学位论文尼古丁在腹主动脉瘤形成中的作用及分子机制研究学科专业：内科学（心血管病）作者姓名：郭真真学号：1127249472指导教师：戴秋艳教授副指导教师：张治朱彦琪吴莹培养单位：上海交通大学附属第一人民医院资助基金项目：国家自然科学基金（81370415）研究方向：心血管疾病诊断及药物治疗申请学位级别：硕士答辩时间：2015年4月23日SHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITYMASTERDISSERTATIONTHEROLEOFNICOTINEINTHEFORMATIONOFAORTICA

2、NEURSMSANDITSUNDERLYINGMOLECULARMECHANISMDISCIPLINEANDSPECIALTY:Medicine;CardiologyAUTHOR:Zhen-zhenGuoSTUDENTID:1127249472TUTOR:Prof.Qiu-yanDaiVICE-TUTOR:ZhiZhang,Yan-qiZhu,YingWuGRANTS:TheNationalNaturalScienceFund（81370415）AFFILIATIONS：ShanghaiJiaotongUnivers

3、ityAffiliatedFirstPeople’sHospitalRESEARCHINTERESTS:DiagnoseandpharmacotherapyofcardiovasculardiseasesDEGREEAPPLICATION:Master’sDegreeDATEOFDEFENSE:Apirl23th,2015上海交通大学硕±学位论文上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文

4、不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：命畫Ｊ日期：年ｒ月今日上海交通大学硕±学位论文上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可［＾将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索

5、，可［＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。＿＿本学位论文属于不保密ｃｆ。＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者签名：ｉｆ１１指导教师签名？Ｊ：日期：抑年月午日日期：年支月令日上海交通大学硕士学位论文尼古丁在腹主动脉瘤形成中的作用及分子机制研究摘要背景：吸烟是主动脉瘤形成和进展的重要危险因素，尼古丁是香烟的主要组成成分。在我们前期研究成果中，体内实验部分，尼古丁联合血管紧张素II诱导了10-12个月龄的雄性C57BL/6J小鼠主动脉

6、瘤的形成，并检测到主动脉瘤组+织中p-JNK、CD68、MMP-2和MMP-9高表达；体外实验部分，尼古丁诱导小鼠巨噬细胞（RAW264.7）在mRNA水平VCAM-1、MMP-2和MMP-9呈剂量依赖性表达，并可能通过JNK信号通路发挥调控作用。目的：在前期研究成果基础上，为了进一步研究尼古丁对主动脉平滑肌细胞和巨噬细胞MMP-2和MMP-9蛋白表达和活性的影响及机制；以及尼古丁对主动脉平滑肌细胞趋化因子表达的调控作用，对巨噬细胞趋化性的影响，再结合趋化因子在动脉瘤组织中的定位表达，从而阐明尼古丁诱导主动脉瘤发生及

7、早期进展的可能分子机制。方法：第一部分，不同浓度尼古丁（0，0.5，5，50，500ng/ml）处理小鼠主动脉平滑肌细胞（MOVAS）和巨噬细胞（RAW264.7），观察对基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达和活性的影响；JNK抑制剂（SP600125）和α7-nAChRs受体激动剂（PNU-282987）处理两种细胞，观察对尼古丁诱导的MMP-2和MMP-9表达和蛋白活性的影响。第二部分，动物实验部分，免疫组化染色法测定主动脉瘤组织中趋化因子MCP-1和RANTES的表达和定位

8、；细胞实验部分，尼古丁处理小鼠主动脉平滑肌细胞，realtimePCR法和ELISA法检测MCP-1和RANTES表达的影响，进一步transwell法观察尼古丁通过对MOVAS细胞的调控对巨噬细胞趋化活性的影响；JNK抑制剂SP600125和α7-nAChRs受体激动剂PNU-282987处理MOVAS细胞，realtimePCR法和I上海交