大鼠肺匀浆上清液体外诱导骨髓间充质干细胞分化的实验研究

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1、乘兩大？參硕±学位论文大鼠肺匀浆上清巧体外诱导骨廚间充巧干细胞分化的实验研究专业名務：外巧举研究生姓名：荆元果导师姓名：刘志更虹ｖｚＹｒｏｓｔｕｄｏｆ化ｅｒａｔｌｕｎｈｏｍｏｅｎａｔｅｙｇｇｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｅｄｔｏＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒｔｈｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＭｅ

2、ｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｇＢＹＬｉｕＹｕａｎｇｕｏＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆ的ｓｏｒ：ＬｉｕＺｈｉｙｏｎｇＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｙ２０１５东南大学学位论文独仓ｊ性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及。取得的研究成果尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大一学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在

3、论文中作了明确的说明并表示了谢意。《曰期、研究生签名；苗帝；｜／东南大学学位论文使用授巧声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送、交学位论文的复印件和电子文档，可ｔｕ采用影印缩印或其他复制手段保一存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相致。除在保密期内的，可公保密论文和在技术保护期限内的论文外，允许论文被查阅和借阅布（包括电子信息形式刊登）论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布（包括Ｗ电子信息形式刊登）授权东南大学研究生院办理。研究生签名：兰：导师签名：日期：１中文巧要大鼠肺

4、匀浆上滑液体外诱导肯體间冗质干细胞分化的买验研究研究生：刘元果导师：刘志勇甲又巧棠目的：探讨大鼠肺匀浆上清液诱导骨髓间充质干细胞向肺渔上皮细胞分化的可行性。方法：利用全骨髓贴壁分离法分离、纯化大鼠的间充质干细胞，观察细胞的形态，绘制生长曲线，并采用流式细胞术检测细胞表面抗原ＣＤ巧、ＣＤ９０ＣＤ４５、ＣＤ３Ｄ４９ｄ、４、Ｃ的表达情况。经曾细胞、脂肪细胞、软骨细胞诱导液诱导后，分别采用茜素红染色法、油红０染色法、甲苯胺蓝染色法检测骨髓间充质干细胞的诱导分化情况。正常肺组织和博来霉素诱导的损伤肺组织，分别提取匀浆上清液，诱导第３代骨髓间

5、充质干细胞。实验组分为Ｈ组：骨髓间充质干细胞组，骨髓间充质干细胞＋正常大鼠肺匀浆上清液組，骨髓间充质干细胞＋博来霉素损伤大鼠肺匀浆上清液組，持续巧导１０天，通过细胞免疫巧光法和ＲＴ－ＰＣＲ法分ＳＰ－Ｃ的表达别在蛋白水平和基因水平检测。一结果：骨髓间充质干细胞培养到第３代时形成游祸状、纺巧形、形态相对均的贴壁细胞Ｄ９０呈阳也ＣＤ４９ｄ、ＣＤ３４、ＣＤ４５。流式细胞术检测结果显示其表面抗原ｃｍ、Ｃ呈阴性。骨髓间充质干细胞经骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞诱导液诱导后，茜素红染色呈红色，油紅０染色呈橘红色，甲苯胺蓝呈蓝色。经肺匀浆上清液诱导后的骨髓

6、间充质－－干细胞－，细胞免疫巧光和ＲＴＰＣＲ显示各干预组均有ＳＰＣ蛋白的表达，对照姐无ＳＰＣ蛋白的表达。统计学分析结果：正常及博来霉素损伤大鼠肺匀浆上清液诱导细胞免疫巧－Ｃ蛋白的表达阳性－光ＳＰ．２９％及２５．２７％ＲＴＰＣ民检测盈示博率分别为Ｂ；来霉素损伤的肺匀浆上清液阳性率较正常肺匀浆上清液髙。结论：全骨髓贴壁分离法可有效获得数量充足、生长状态良好并具有分化潜能的间充质干细胞。大聞正常肺匀浆上清液和博来霉素损伤的肺匀浆上清液均可１＾＾诱导骨髓间充质干细胞向肺泡上皮细胞分化，博来霉素损伤的肺匀浆上清液比正常的肺匀浆上清液诱导能力更

7、强。关链词：骨髓间充质干细胞，肺匀浆上清液，细胞分化，大鼠巧误１未度义书签。英文巧要Ｉｎｖｉｔｒｏｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｒａｔｌｕｎｈｏｍｏｅｎａｔｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｏｎｇｇｒｔｏｎｏｎｅ－ｍａ姐瓶ｅｎｔｉａｉｏｆｂｍａｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｙＰｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ：ＬｉｕＹｕａｎｇｕｏＴｕｔｏｒ；ＬｉｕＺｈｉｙｏｎｇ乂ｂｓｌｒａｃｔＯｂｊｅｃｔ：Ｔｏｉ打ｖｅ巧ｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｒａｔｌｕｎｇｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ

8、ｓｕｐｅｒ