探索青贮乳酸菌菌株特性分析与发酵条件研究

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1、天津大学硕士学位论文青贮乳酸菌菌株特性分析与发酵条件研究姓名：崔卫东申请学位级别：硕士专业：化学工程指导教师：闻建平;陈蓝天20090501摘要国内外青贮技术的研究重点是研制能够促进青贮料快速乳酸发酵的活菌制剂，以保证和改善青贮饲料质量。获得高活性青贮接种剂的技术关键在于菌种的选育、发酵工艺优化及冻干保护剂的选择。本文对青贮乳酸菌(粪肠球菌(Enterococcusfaecalis，EF．1)和戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus，PP．2))的耐温性、耐盐性以及利用淀粉产酸能力等特

2、性进行了初步研究，并对其L(+)．乳酸产生情况进行了定性和定量分析。结果表明，这2株菌具有在高温(45"C)、高盐(6％NaCI)和酸性(pH4．O)条件下生长能力，EF—l产酸达：10．9g／L，PP．2产酸达：15．1g／L。通过对培养基、初始pH、温度等发酵条件优化，确定了2株乳酸菌的摇瓶发酵参数和戊糖片球菌PP．2菌株的10L罐发酵条件。初步研究确定了冻干保护剂的种类和配比。EF-1菌株摇瓶培养基组分和培养条件为：葡萄糖50g、玉米浆50g、K2HP045g、MgS041g、FeS040．2g、

3、CaC031g、Tween80lml。初始pH7．0，温度为37℃，接种量为3％。PP．2菌株摇瓶培养基组分和培养条件为：葡萄糖50g、蛋白胨20g、酵母膏30g、K2HP0420g、MgS040．1g、MnS040．15g、柠檬酸氢二铵4g、CH3COONa4g、Tween80lml。初始pH7．0，温度为37"(2，接种量为8％。PP．2菌株10L罐发酵条件为：温度：37"C；转速：100rpm：pH维持7．0(流加氨水调节)，通气量：O．05L／rain；发酵周期16—18h。最佳冻干保护剂为：4

4、％脱脂奶粉+2％葡萄糖+2％海藻糖+5％甘油。关键词：青贮饲料；青贮接种剂；粪肠球菌；戊糖片球菌；发酵条件AbstractThesilagetechnologystudyisfocusingcurrentlyonthelivingbacteriainoculantswhichCallpromotelacticfermentationofensilingtoensBreandimprovesilagequali够Thekeytohighefficientsilageinoculantsistheselec

5、tionoflacticbacteria,theoptimizationoffermentationprocessandthedeterminationofthefreeze—dryingprotectiveagent．ThisstudyfocusedonthecharacteristicanalysisoftwoefficientstrainsofEnterococcusfaecali5(EF一1)andPediococcuspentosaceus(PP一2)includingtemperaturer

6、esistance．saltresistanceandlacticacidproductivityfromstarch．TheL(+)一lacticacidproductivitiesofthetwostrainshavebeenmeasuredbyqualitativeandquantitativemethods．Theresultsshownthatthetwostainsaresuperiorinhightemperatureresistance(45。C)，saltresistance(6％Na

7、O)andacidresistanceQH4．0)．Thelacticacidproductivitiesofthetwostrainsare10．9ereand15．1grLrespectively．Thefermentationparametersfortheflaskand10一litrefermentorhavebeendeterminedbytheoptimizationofculturemedium，initialpH，andtemperatureandSOon．Thetypesandrat

8、ioofthefreeze-dryingprotectiveagenthasbeenalsodeterminedpreliminarily．Theoptimalflaskmediumandfermentationparametersforthetwostrainsarefollowing：EF—l：glucose509，cornsteep509，K2HP0459，MgS04lg，FeS04O．29，CaCOslg，Tween80lml，in