探索量子点的在免疫分析中的应用

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1、上海交通大学硕士学位论文量子点的在免疫分析中的应用姓名：邵君申请学位级别：硕士专业：化学工程指导教师：高峰20070101上海交通大学硕士论文量子点在免疫分析中的应用摘要随着纳米科技的兴起,量子点以其独特的光学性质在许多领域表现出潜在的应用价值,引起了人们浓厚的研究兴趣。由于其强于有机染料的荧光稳定性、激发光谱宽、发射光谱窄等优点，量子点作为标记物应用于免疫诊断和免疫分析中，逐渐取代传统的三大标记技术。因此探索用量子点标记建立快速简便的免疫学定量检测方法，有重要的研究意义。本文研究了pH值、缓冲溶液、温度、保存时间、氨基酸和蛋白质对量子点荧光性能的影响。采用连接剂将蛋白

2、质与量子点偶联，通过酶联免疫竞争抑制法和斑点免疫渗滤法检测标记到量子点上蛋白质的活性。量子点和蛋白质连接后粒子分散性好，具有生物活性，可应用于免疫学检测。利用量子点的光学性能，建立了两种新颖的量子点标记的免疫分析方法，即量子点标记的免疫凝集分析法和量子点-纳米金荧光淬灭分析法，检测溶液中抗体或抗原的浓度。量子点标记的免疫凝集分析法是：采用量子点标记羊抗鼠IgG与鼠IgG免疫反应后形成网络结构，使量子点发生凝集，荧光信号减低，研究反应溶液中量子点荧光强度的变化，建立量子点标记的免疫凝集分析法，定量检测鼠IgG的浓度，最低检测极限为1.3nmol/L。量子点-纳米金荧光淬灭

3、免疫分析法是采用量子点和纳米金粒子分别标记待测抗原相匹配的两种抗体，通过免疫反应形成抗原抗体复合物，使量子点与金粒子的距离靠近，量子点的能量转移给金粒子，引起量子点荧光淬灭，实验结果显示在570nm处信号淬灭的程度与体系中被6上海交通大学硕士论文测物量存在相关性，据此建立了量子点-纳米金免疫荧光淬灭分析法定量检测乙肝表面抗原，检测极限达0.928ng/mL。以上两种方法只需检测反应体系中量子点荧光强度的变化就可检测靶物质的浓度，不需要分离抗原抗体的复合物，可直接检测，该方法简单方便，灵敏度高，在免疫分析和疾病诊断中有着广阔的应用前景。关键词：量子点，蛋白质，纳米金粒子，

4、免疫分析，荧光淬灭7上海交通大学硕士论文APPLICATIONSOFQUANTUMDOTSINIMMUNOASSAYSABSTRACTQuantumdots(QDs),asaclassofnanomaterialswithmanyuniqueproperties,havebeenexploredpotentialapplicationsinbiomoleculardetection.Incompassionwithorganicdyes,QDsoffersuchadvantagesasbetterfluorescencestabilities,narrowemissio

5、nbandwidthsandbroadabsorptionspectra.Asamarkerappliedinimmunediagnoseandimmunoassay,itisatrendthatQDsareinsteadofthreetraditionallabeledtechnologies.ItisimportanttoresearchthequantificationalimmunedetectionbyQDs.HereinnovelimmunoassayswereestablishedbyQDsfortheirfluorescenceproperties.In

6、fluencesofpH,buffers,temperature,savetime,aminoacidsandproteinsonfluorescenceofQDswerestudied.QDslinkedwithproteinsbyEDC.CompetitiveinhibitionELISAmethodofmagneticparticles-SAandCdTe-SAtoBiotin-HRPanddotimmuno-percolationwereusedtodetectthebiologicactivityofproteinsafterlabeling.Theresul

7、tsprovedthattheCdTe-ptoteincompositecouldbeappliedinimmunoassaysasithadgooddispersivityandgoodbioactivity.UtilizingthefluorescencepropertiesofQDs,twonovelimmunoassayswereestablished,whichweretheaggregation-basedimmunoassayandfluorescencequenchingimmunoassay.Thesetwomethod