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《人血浆非对称性二甲基精氨酸浓度的rp-hplc测定法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
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5、inine,ADMA)浓度的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法:采用WaterssymmetryC18柱(5μm,3.90mm×150mm),以0.05mmol/L乙酸钠(pH6.8)为流动相A,甲醇为流动相B,线性梯度洗脱:14%15min,31%25min,45%5min(V/V/V),流速1.0ml/min,荧光检测,激发波长330nm,发射波长450nm,邻苯二甲醛(OPA)进行柱前衍生,室温下检测。结果:ADMA在0.05~5μg/ml范围内有良好线性关系,最小检出量为0.05μg/ml,平均相对回收率为(93.76±2.57)%,日内、日间平均变异系数分别为(3.
6、25±1.59)%、(4.60±1.37)%。结论:本方法准确、简便、快速,适用于科学研究和临床检测。【关键词】非对称性二甲基精氨酸色谱法反相高效液相血浆中非对称性二甲基精氨酸(Asymmetricaldimethylarginine,ADMA)浓度变化与心血管疾病发生发展密切相关,近年来研究显示ADMA升高是一种新的心血管病危险因素。关于血浆中ADMA浓度的检测方法,国外虽已有报道,但操作繁琐,干扰因素多。国内曾有采用正相色谱法的报道。本研究在国内外同类研究的基础上适当改进,采用反相色谱法,用一元线性梯度洗脱,建立一套准确、简便、快速的高效液相色谱法检测人血浆中ADMA浓度的方法,
7、报告如下。1材料1.1试剂AMDA标准品、衍生剂OPA、3-巯基丙酸均购自Sigma公司,HPLC分析纯度99.99%;甲醇为一级色谱纯,购自天津市四友生物医药科技有限公司;硼酸为一级色谱纯,购自上海试剂总厂;乙酸钠、冰乙酸、氢氧化钾、5-磺基水杨酸为分析纯,购自上海试剂总厂。超纯水(18.25MΩ·cm)。1.2仪器与设备高效液相色谱仪为Agilent1100系列,包括G1322在线脱气机、G1311A四元泵、G1316A柱温箱、G1321AFLD荧光检
