量子点标记纳米微球金黄色葡萄球菌快速检测方法

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1、天津科技大学研究生学位论文(申请硕±学位)量子点标记纳米微球金黄色葡萄球茵快速检测方法THERANDDETECTIONMETHODOFSTAPHYLOCOCCUSAUREUSWITHQUANTUMDOTSNANOSPHERESini.-l'I'一‘、一,‘\,...VtV气..,?-专业名称:农产品加工及胆藏工程(农).....己:指导教师:王俊平教授;记:一研究生姓名:李真珍'■■'■:古,:申请学位级别:农学硕;i论文提交日期:2016年03月I:10057分类号:S

2、3学校代码811503密级:研巧生学号;13量子点标记纳米微球金黄色荀萄球菌快速检测方法TheRapidDetectionMethodofStaphylococcusAureuswithQuantumDotsNanospheres专业名称:农产品加工及胆藏工程(农)指导教师姓名:王俊平教授研巧生姓名:李真珍申请学位级别;农学硕±论文提交日期;2016年03月论文课题来源:国家科技部863项目学位授予单位:天津科技大学天津科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得

3、的成果。除文中特别加W标注引用的内容外,本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果内容,也不包括为获得夭津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文研巧做出重要贡献的个人和集体,均已在文中W明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:日期:>4年、月日^知识产权和专利权保护声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研究经费支持,下完成的,其数据和研究成果归属于导师和作者本人知识产权单位属天津科技大学;所涉及的创造性发明的专利权及使用权完全归天津科技大学所有。本人保证毕业后,本论文

4、数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:日期:>年^月日it学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,同意公布论文的全部或部分内容,允许论文被査阅和借阅。本人授权天津科技大学可W将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。""保密D(请在方框内打V),在年解密后适用本授权书。本学位论文属于""不保

5、(请在方框内打心)。f作者签名:曰期:年、月日导师签名;日期:年、月<曰7摘要近年来,金黄色葡萄球菌引起的中毒事件频频发生,传统的金黄色葡萄球菌检测一种可W灵敏基于微生物培养,虽然相对准确,但是耗时费力,因而急需、快速、可、靠的检测金黄色葡萄球菌的方法。现代快速检测方法中,化学仪器检测能够快速直观、灵敏的反映检测结果,实现快速检测,但是,如何将微生物信号转变为可检测的一化学信号就成为检测过程中相当重要的步。量子点具有良好的光谱特性和自身优点,使其可W替代传统巧光染料,作为生物巧光探针,本论文使用量子点标记IsdA兔抗抗体,采用注射器与滤膜姐合的

6、方式检测金黄色葡萄球菌,为生物信号的富集提供了一种方法,有助于快速检测。W琉基乙酸为稳定剂一CdTe量子点一,对比步法和两步法合成,步法明显优于一CdT两步法,最终使用谷脫甘狀为稳定剂,步法合成了巧光强度较佳的e量子点,红外吸收图谱显示GSH-CdTe量子点并进行了红外表征,,含有綾基及氨基功能基团,一可进行下步的生物应用。重组表达IsdA蛋白,纯化,免疫兔子和小鼠,制备多克隆抗体,但是抗血清及--.lmMIPTGBL21DE326bIsdA抗体效价都不佳。O诱导对数期的大肠巧菌()pET,成功地表达了IsdA重组蛋白,且为可溶性表达;纯化IsdA重组

7、蛋白;免疫兔子和小鼠,制备出多克隆抗体;谷脫甘狀免疫量子点紫外全波长扫描图显示,量子点与抗体连接后,量子点的巧光强度增强,表巧量子点与抗体连接成功。初步建立了量子点标记IsdA兔抗抗体免疫检测金黄色葡萄球菌的方法,该法对金黄色葡萄球菌有明显的特异性吸附,同时,大肠杆菌有略微的非特异性吸附,检测53限约为2.37xl〇CFU/mL。主要检测了牛奶样品,lUl〇M〇CFU/mL的标准将菌液接h时完全不能h。入样品中,牛奶

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