耐力运动对sir2基因沉默老年果蝇心功能及睡眠的影响

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1、硕士学位论文耐力运动对Sir2基因沉默老年果蝇心功能及睡眠的影响学科专业运动人体科学学位类型√□科学学位□专业学位研究生姓名陈珏君导师姓名、职称郑澜教授论文编号湖南师范大学学位评定委员会办公室二〇一六年六月分类号密级学校代码10542学号201302151227耐力运动对Sir2基因沉默老年果蝇心功能及睡眠的影响EffectofenduranceexerciseoncardiacfunctionandsleepinagingSir2genesilencingDrosophila研究生姓名陈珏君指导教师

2、姓名、职称郑澜教授学科专业运动人体科学研究方向心血管的运动适应注:国家自然科学基金资助(NO.31071039)博士点基金博导类课题(NO.20134306110009)湖南师范大学学位评定委员会办公室二〇一六年六月湖南师范大学学位论文原创性声明,,本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中臣经注明引巧的巧容外,本论文不含任何其他个人或集体&经发表或撰写过的作品成果。对本文的^研究做出重要贡献的个人和集体1。本人,均臣在文中义明确方式标明

3、完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签違:>乂年^月曰湖南师范大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,研究生在校攻读学位期间论文工作的知巧产权单位属湖南师范大学。:同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南师范大学可L乂将本学位论文的、全部或部分巧容编入有关数据库进行捡索,可L乂采用影印缩巧或担描等复制手段保存和汇编本学位论文。方白//作者签名:森琴日期:>

4、峰月曰"?>导师签名苗/日:多為日期^/矣年^月I摘要1研究目的本研究采用UAS-Gal4二元转基因系统介入致使果蝇Sir2基因表达敲减,采用果蝇垂直转动运动装置,研究耐力运动对Sir2基因敲减老年果蝇的影响,以及耐力运动、Sir2基因与心功能、睡眠、寿命的联系,旨在找出一种能够改善老年果蝇心脏功能,提高老年果蝇运动能力,改善睡眠质量并延长果蝇平均寿命的方法,为耐力运动结合Sir2基因敲减干预在延缓衰老方面的研究提供理论依据。2研究方法实验模型构建:采用三个果蝇品系:Sir2敲减系(y[1]

5、w[67c23];P{w[+mC]y[+mDint2]=EPgy2}Sirt1[EY22867]DnaJ-H[EY221118867])、W野生型和arm-Gal4品系。方法:雄性arm-Gal4品系分1118别与雌性W野生型和雌性Sir2基因敲减型果蝇杂交,得到F1代1118W/arm-Gal4(野生组)和sir2/arm-Gal4(敲减组),收集两品系6-10小时内羽化的处女蝇各3200只,随机分为8组:2周11181118W/arm-Gal4野生对照组(2W-C-W/arm-Gal4),2周si

6、r2/arm-Gal41118敲减对照组(2W-C-sir2/arm-Gal4),2周W/arm-Gal4野生运动组1118(2W-E-W/arm-Gal4),2周sir2/arm-Gal4敲减运动组1118(2W-E-sir2/arm-Gal4),6周W/arm-Gal4野生对照组1118(6W-C-W/arm-Gal4),6周sir2/arm-Gal4敲减对照组I1118(6W-C-sir2/arm-Gal4),6周W/arm-Gal4野生运动组1118(6W-E-W/arm-Gal4),6周si

7、r2/arm-Gal4敲减运动组(6W-E-sir2/arm-Gal4),每组400只,分装于20管内,置于培养箱中饲养。采用果蝇垂直转动运动装置,运动组均从第二天龄开始运动,每天训练两小时,连续运动5天,休息2天,分别运动两周和六周,装置转速频率的设定根据果蝇的实际运动情况作相应调整。(装置频率初设置为280Hz,间隔时间7s,四周运动过后调整至间隔时间14s)从构建的两种品系中分别随机挑选出10只果蝇进行RT-PCR检测,16只果蝇进行DAMS果蝇活动监测,30只果蝇进行M-mode检测,100只

8、进行攀爬能力测验,100只统计生命周期。3研究结果3.1实时荧光定量PCR检测1118与W/arm-Gal4组相比,Sir2/arm-Gal4组表达量降低,敲减率为61.92%,表明F1代Sir2基因敲减果蝇品系构建成功。3.2心功能检测11181118与6W-C-W/arm-Gal4组相比,6W-E-W/arm-Gal4组心脏纤维性震颤下降(P<0.05),提示运动可以降低野生型老年果蝇纤维性1118震颤的发生风险。6W-C-sir2/arm-Gal4

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