我院铜绿假单胞菌的耐药性和耐药基因的检测与分析

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1、分类号：R378.99+1学校代码：10062密级：学号：2010804004学位类别：科学学位□√专业学位
学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：我院铜绿假单胞菌的耐药性和耐药基因的检测与分析TITLEDetectionandanalysisofdrugresistanceandresistantgenesofPseudomonasaeruginosainourhospital.一级学科：基础医学二级学科：免疫学论文作者：蔡东波指导教师：赵树君天津医科大学研究生院二零一五年五月学位论

2、文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关

3、部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的:分析天津市北辰区中医院PA（Pseudomonasaeruginosa，铜绿假单胞菌）的检出情况和耐药性，为指导临床控制铜绿假单胞菌感染、合理使用抗菌药及延缓细菌耐药产生提供参考；另外，为了了解本院铜绿假单胞菌的耐药机制，指导临床合理用药，本论文从β-内酰胺酶编码基因种类、存在状况和外膜蛋白OprD2基因缺失状况方面分别

4、进行了初步研究。方法:1.采集我院住院患者送检标本分离的铜绿假单胞菌共58株，鉴定菌株的室验采用ATBExpression细菌鉴定系统，来源于法国梅里埃公司；药敏试验采用ATBExpression细菌药敏板条，以及琼脂纸片扩散（K-B）法进行细菌药物敏感试验。2用PCR(polymerasechainreaction，聚合酶链反应)法检测17种铜绿假单胞菌相关耐药基因。3对铜绿假单胞菌其中几种耐药基因的PCR扩增产物进行了测序，并将测序结果与GenBank登录的结果进行比对。结果1.通过对18种抗生素做药敏试验，58株铜绿

5、假单胞菌耐药率高的有氨苄西林+舒巴坦100%、头孢克洛95.4%、头孢丙烯95.4%、头孢克肟94.4%、头孢美唑94.3%，耐药率较高的是替卡西林/克拉维酸64.6%，其余抗生素磷霉素、依替米星、阿洛西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、庆大霉素、诺氟沙星、左氧氟沙星、氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星的耐药率为36.6%、32.1%、31.1%、26%、22.9%、17.4%、16.5%、15.5%、15.5%、12.8%、7.33%，其中亚胺培南的耐药率为10%。2.58株铜绿假单胞菌中β-内酰胺酶编码基因及检出率：T

6、EM（15.5%)、TEM-1(10.3%)、VEB(1.7%)、SHV(6.8%)、GES(3.4%)、PER(3.4%)、OXA-1(32.7%)、OXA-2（15.5%）、OXA-10（13.7%）、CTX-M-1（24.1%）；金属β-内酰胺酶基因及检出率为：ⅥM（25.9%）、IMP（19%）、SPM（6.8%）、GIM（0%）、SIM（0%）；质粒AmpC酶基因DHA的检出率是10.3％；膜孔蛋白OprD2基因的缺失率为48.3％。3.VEB、SHV、TEM和DHA4个基因的核苷酸序列与Genebank中参比基

7、因序列同源性均为100％，未发现基因变异现象。结论：1.本院铜绿假单胞菌对氨苄西林+舒巴坦的耐药率最高为100%，对于氨I天津医科大学硕士学位论文苄西林铜绿假单胞菌是天然耐药，即使加了舒巴坦酶抑制剂，我院统计耐药率仍然是百分之百；其次是头孢克洛为95.4%、头孢丙烯为95.4%，头孢克肟为94.4%，头孢美唑也达到了94.3%，对于这些耐药率超过75%的抗菌药物，应暂停该类抗菌药物的临床应用，根据追踪细菌耐药监测结果，再决定是否恢复其临床应用。耐药率超过50%的抗菌药物为替卡西林/克拉维酸64.6%，应参照药敏试验结果选用

8、抗生素；耐药率超过40%的抗菌药物，应慎重经验用药；耐药率超过30%的抗菌药物有磷霉素36.6%、依替米星32.1%、阿洛西林31.1%，应及时将预警信息通报本院医护人员；低于30%的抗菌药物有哌拉西林/他唑巴坦26.0%、头孢曲松22.9%、庆大霉素17.4%、诺氟沙星16.5%、氨曲南15.5%、头