慢性间歇低氧大鼠模型内皮细胞与中性多核白细胞相互作用致内皮细胞损伤中炎症机制的研究

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1、EB分类号：R56学校代码：10062密级：学号：2011702309硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：慢性间歇低氧大鼠内皮细胞与中性多核白细胞相互作用致内皮细胞损伤中炎症机制的研究TITLEThestudyofinflammatorymechanisminendothelialcellsinjuryinducedbytheinteractionofendothelialcellsandpolymorphonuclearleukocytesfromratsexposedtochronicinter

2、mittenthypoxia一级学科：临床医学二级学科：内科学呼吸系病论文作者：陈云霞指导教师：陈宝元教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R56学校代码：10062密级：学号：2011702309学位类别：专业学位√科学学位学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：慢性间歇低氧大鼠模型内皮细胞与中性多核白细胞相互作用致内皮细胞损伤中炎症机制的研究TITLEThestudyofinflammatorymechanisminendothelialcellsinjuryinduced

3、bytheinteractionofendothelialcellsandpolymorphonuclearleukocytesfromratsexposedtochronicintermittenthypoxia一级学科：临床医学二级学科：内科学呼吸系病论文作者：陈云霞指导教师：陈宝元教授导师组成员：曹洁主任医师天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表

4、或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密√。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日天津医

5、科大学硕士学位论文摘要中文摘要研究背景与目的阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（Obstructivesleepapneasyndrome，OSAS）是一种常见疾病，主要表现为睡眠状态下反复出现呼吸暂停和低通气，其重要病理生理学改变是反复呼吸暂停形成的慢性间歇性低氧（Chronicintermittenthypoxia，CIH）。CIH引发机体一系列氧化应激与炎症反应致血管内皮损伤，显著增加冠状动脉动脉粥样硬化、高血压等心血管疾病的风险。氧化应激与炎性反应的生物活性物质主要来源于激活的多形核粒细胞（polymorphonuclearP

6、MN），PMN易被各种刺激因素包括CIH所激活,且PMN占循环白细胞总数的近60%，与血管内皮细胞接触多、接触直接。PMN与内皮细胞的相互作用是多种疾病的病理生理学基础。为此，本实验通过分离常氧大鼠和CIH暴露大鼠的PMN分别与常氧及CIH暴露的大鼠主动脉内皮细胞共培养，采用直接共培养及transwell共培养方式，通过观察TNF-α及NF-κB，探讨CIH环境下PMN与内皮细胞的相互作用及机制。为临床上预防和治疗OSAS及其合并症提供理论依据。内容1.不同间歇低氧暴露条件下内皮细胞与中性多核白细胞共培养上清中TNF-α水平

7、比较2.不同间歇低氧暴露条件下内皮细胞与中性多核白细胞共培养后内皮细胞中NF-κB水平比较方法8周龄雄性Wistar大鼠18只，随机分为常氧对照组和间歇低氧组。CIH组暴露于间歇低氧环境中，氧浓度波动于5.4%-20.7%，低氧频率为30次/h，8h/d，以模拟OSAS患者间歇低氧的过程。常氧对照组舱内充入相应频率及流量变化[1]的压缩空气，持续时间6周。6周后处死大鼠，腹主动脉取血，双层Ficoll-Histopaque密度梯度离心法分离纯化PMN。纯化的PMN在RPMI-16406[2]培养基中重悬，调整细胞浓度为1x1

8、0/ml，用于与大鼠主动脉内皮细胞共培养。大鼠主动脉内皮细胞用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液培养。内皮细胞间歇低氧组暴露于间歇低氧环境中，300秒为一循环，每个循环的前45秒向I天津医科大学硕士学位论文摘要细胞低氧舱内输入含5%CO2、1.5%O2、93.5%N2的混合气体，接