弥漫大b细胞淋巴瘤中mir-29b的表达及功能研究

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1、学校代码10459学号或申请号201212262825密级公开硕士学位论文弥漫大B细胞淋巴瘤中miR-29b的表达及功能研究作者姓名：宋秋娟导师姓名：李文才教授赵武干博士学科门类:医学专业名称：病理学与病理生理学培养院系：基础医学院冗成时间：2015年5月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofmasterExpressionandfunctionofmicroRNA-29bindiffuselargeB-celllymphomaBy:Qiuj

2、uanSongSupervisor:Prof.WencaiLiWuganZhaoPathologyandPathophysiologyBasicalMedicSchool�ZhengzhouUniversityMay2015学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作

3、者：日期：二o丨s年今月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：曰期

4、：20/夕年么月立o日弥漫大B细胞淋巴瘤中miR-29b的表达及功能硕士研究生：宋秋娟导师：李文才赵武干郑州大学基础医学院病理学教研室郑州450001摘要弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuselargeB-celllymphoma，DLBCL）是一组临床和生物学特性各异的异质性肿瘤，约占非霍奇金淋巴瘤（non-hodgkin’slymphoma,NHL）的40%，其在发展中国家高达60%，而现有治疗方法只能使40-50%的病人获得临床持续缓解。因此寻找新的分子标志在临床上对其诊断和治疗有着一定的积极意义。Mi

5、croRNAs(miRNAs)作为一种单链的非编码小分子RNA，其长度约为22-25个碱基对构成，该类RNA在转录之后对基因的表达起到调控作用，根据抑制或是降解靶基因功能其分为两种。研究表明，miRNAs对免疫系统的调控，在体内细胞的增殖分化和生长发育起着一定的重要作用，对肿瘤的发生发展也发挥着一定的抑制或促进作用。在不同的肿瘤中，不同的miRNAs表达模式也不尽相同，因此在临床上可作为预测、诊断以及治疗的生物学标志。研究表明miR-29b作为miRNAs中的一员，它可以沉默一些潜在的癌基因，抑制肿瘤细胞

6、生长，诱导凋亡，发挥抑癌基因的作用。研究也表明，miR-29b功能存在着异质性，目前miR-29b在DLBCL中的表达及功能还缺乏相应的研究，因此本研究通过分析miR-29b在DLBCL细胞系中的表达、功能，探讨miR-29b在DLBCL发生发展中的功能。目的了解DLBCL细胞系中miR-29b的表达情况；观察miR-29bmimic和miR-29binhibitor在DLBCL两种细胞系SU-DHL-8，SU-DHL-10的转染率情况；I探讨miR-29b对SU-DHL-8，SU-DHL-10两种细胞系

7、增殖情况的影响；研究miR-29b对DLBCL两种细胞系SU-DHL-8，SU-DHL-10细胞迁移能力的影响。研究miR-29b对DLBCL两种细胞系SU-DHL-8，SU-DHL-10细胞凋亡的影响。方法1、利用Trizol试剂提取淋巴细胞和人正常淋巴结组织中总RNA，根据miR-29b设计的反转录引物及qRT-PCR引物；利用qRT-PCR方法检测DLBCL细胞系中miR-29b的表达情况。2、根据miR-29b的序列合成miR-29bmimic和miR-29binhibitor，将合成的miR-2

8、9bmimic和miR-29binhibitor转染入DLBCL细胞系中，通过qRT-PCR方法检测miR-29b的表达量。3、通过利用CCK-8细胞生长实验检测miR-29b对DLBCL细胞系细胞增殖能力的影响；4、运用Transwell迁移实验检测miR-29b对DLBCL细胞系细胞迁移能力的影响，并通过流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果1.通过qRT-PCR方法检测DLBCL细胞系中miR-29b的表达结果显示，miR-