基于适配体荧光传感器检测ige的方法研究

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1、天津科技大学研究生学位论文．遞巧请硕±学位）■Ｈ基于适配体焚光传感器检测ｉｇＥ的方法研究ＭＭＭＴＨＥＲＥＳＥＡＲＣＨＯＦＩＭＭＵＮＯＧＬＯＢＵＬＩＮＥＤＥＴＥＣＴＩＯＮＭＥＴＨＯＤＢＡＳＥＤＯＮＡＰＴＡＭＥＲＦＬＵＯＲＥＳＣＥＮＴＳＥＮＳＯＲ誦義ＩＩ’ｌｌ专业名称：营养与食品卫生学指导教师：方国臻教授研究生姓名：蒋灿申请学位级别；医学硕±论文提交日期：２０巧年３月１分类号：学校代码：００５７密级：（不保密）研究生学号：１２８１３

2、０２１基于适配体焚光传感器检测ＩｇＥ的方法研究ｔｈｅ民ｅｓｅａｒｃｈｏｆＩｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎＥＤｅｔｅｃｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄＢａｓｅｄｏｎＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔＳｅｎｓｏｒ专业名称：营养与食品卫生指导教师姓名：方国臻教授研究生姓名：蒋灿申请学位级别：医学硕±论文提交日期：２０１５年３月论文课题来源：国家自然科学基金学位授予单位：天津科技大学学位论文原创性声明、本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中特别

3、加Ｗ标注引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果内容，也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：曰期：年月曰媒／］：每知识产权和专利权保护声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研究经费支持，其数据和研究成果归属于导师和作者本人，知识产权单位属天津科技大学下完成的；所涉及的创造性发明的专利权及使用权完全归

4、天津科技大学所有。本人保证毕业后，Ｗ本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：％曰期；必／ｒ年月化曰＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，同意公布论文的全部或部分内容，允许论文被查阅和借阅。本人授权天津科技大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存

5、和汇编本学位论文。＂＂保密Ｄ（请在方框内打Ｖ），在年解密后适用本授权书。本学位论文属于＂‘不保密因（请在方框内巧Ｖ｝。作者签名；藏仙日期年＾月日导师签名：日期：年月３＞摘要一免疫球蛋白Ｅ（ＩｇＥ）是种分泌型免疫球蛋白，在人类过敏反应中起关键作用。一ＩＥ般情况下，，ｇ在人血清中的含量很低然而在过敏性哮喘、过敏性皮炎或其他免疫缺陷病的病人血清内，ＩｇＥ含量会升高。因此，建立简便、快速、灵敏的ＩｇＥ的检测方法对于过敏性疾病的临床诊断至关重要。本文结合巧光光谱分析技术和具有高特异

6、一种基于能量共振转移原理的巧光传感器检测性识别能力的核酸适配体，建立了ＩｇＥ的方法。一Ｃ５—氧化石墨婦本文Ｗ花菁类巧光染料ｙ和水溶性好的碳纳米材料（ＧＯ）＇’分别作为巧光能量的供体和受体。当５端柄尼有Ｃｙ５的ＩｇＥ的适配体核酸链和ＧＯ同时，５存在时，它们之间产生７ＷＣ共扼堆积作用，而被稳定地吸附在ＧＯ的表面Ｃｙ与ＧＯ靠，，Ｃｙ５的萊光被巧灭。当ＩｇＥ存在时近发生能量共振转移，核酸适配体与其特异性结－，，合形成蛋白质适配体复合物，ＧＯ对复合物吸附能力减弱复合物脱离ＧＯ的表面３Ｄ－ＥＭＭ５Ｃｙ５

7、的巧光信号得到恢复。实验首先采用王维炎光光谱（）分析法对Ｃｙ标记７５ｎｍ适配体后的巧光性质进行了分析，确定了６３３ｎｍ为激发波长（Ｅｘ），６为发射波（长巧ｍ），ＧＯ）等巧种碳纳米材料进行了选。然后根据巧光粹灭性能对氧化石墨娇Ｍ２＋择，优化了检测体系的ｐＨ值和离子强度（ｇ浓度），考紫了适配体釉ｇＥ的脾巧温度Ｍ２＋Ｈ．４Ｉｍｍｏ和时间。结果表明，ＧＯ为最佳巧灭剂，检测体系ｐ化为７，ｇ浓度为ｌ／Ｌ，°３７Ｃ条件下，脾育３０ｍｉｎ时，巧光信号恢复的响化化嚴扣。化最佳的架验条件Ｋ，对－Ｅ５１０／Ｌ．

8、０１不同浓度的Ｉｇ溶液进行检测，得到化０ｎｍｏｌ的线性范闽，检出限为００ｎｍｏｌ／Ｌ。与ＩｇＥ结构化似的ＩｇＧ（免疫球蛋白Ｇ）巧血诣中大量存在的ＨＳＡ（人血措白蛋白，说明本知法Ｋ有好的选择性和高的特巧）在高浓度时对实验体系的响应值很低性。将本文建立的度法对血清样品中１３￡含助进巧检测