基于血栓素探讨类风湿关节炎血瘀病机的分子机制研究

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1、分巧巧胳巧．６学校代号１０５７２ＵＤＣ６１０巧级学号２００８０５４０３３（ｉ）户州中度為夫聲、’，，二卢ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉ打ｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ硕±学位论文基于血栓素探讨类风湿关节炎血據病化的分子机制研究学位申请人王巧杰指导教师姓名黄淸營专业名称中医学申请学位类型专业学位论文巧交日期２０１５年４月广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明；所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特

2、别加Ｗ注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。举仿论专化者答名少＾Ｉ日期年弓月＞中日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学巧保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文

3、在解密后应遵守此规定）论文作者签＾论义导师辦日期；一ＩＳ年月Ｉ伯摘要目的：通过文献研究了解中医临床治疗蒋证的用药特点Ｗ及活血化疲药的运用情况；从临床研究出发，探讨类风湿关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）疾病活动度与患者血清ＴｘＡ２表达水平的相关性；最后利用分子生物学方法初步揭示血栓素在类风湿关节炎的发病机制中的相关通路。本课题将基于血栓素深入探讨血疲病机，寻找治疗ＲＡ的新帮点和新方向，并促进中医药的发展和推广。方法：１．文献研究主要采用频数分析方法。本课题先对纳入医案的处方用药进行规范化处

4、理，然后运用ＥＭ平台的频数分析模块分析处理数据。２．临床研究的研究方法包括信息采集Ｗ及化ＩＳＡ。通过信息采集汇总ＲＡ患者的基８ＥＬＩＳＡＲＡ患者化及本信息、与ＤＡＳ２评分相关信息Ｗ及用药信息等；使用方法检测健康体检人群血样标本中ＴｘＢ２的表达。并对ＤＡＳ２８与ＴｘＢ２进行相关性检验。３．基础研究的研究方法包括细胞培养、ＭＴＳ、ＰＣＲ、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ等实验方法。结果；１．文献研究：研究共纳入１６１个符合条件的医案，共涉及１９６味中药，总使用频２０９９．０４数为次，平均每个处方含１３味药。频数分析结果证明近现代医家临床常用

5、１巧风湿药、补虚药化及活血化疯药治疗瘦证。同时活血化疲药运用广泛，在６１个处方中５６，占９６．９１％。，高达１个处方使用到活血化疲药２．临床研究：非ＤＭＡＲＤｓ组与ＤＭＡＲＤｓ組的活动期ＲＡ患者ＤＡＳ２８评分无统计学差＊品ＩＡＫＤ１义５２弓７ｉ．８ｘ３弓ｙ．ｎｕＢＺＡ．３完。韦Ｄ：ＩＡＫＤａ＾而＆這千Ｗ皿相衣込里分品刀叩ｇ／和±２７５．Ｉｐｇ／ｍｌ。组间差异也无统计学意义。而健康对照组ＴｘＢ２表达量仅为３６９．１±１２７．Ｉｐｇ／ｍｌ，明显低于两姐ＲＡ患者血清ＴｘＢ２水平（均为如０．０５）。ＤＡＳ２８评分与血清ＴｘＢ２表法量

6、的Ｐｅａｒｓｏｎ和Ｓｐｅａｒｍａｎ相关性分析结果提示在非ＤＭＡＲＤｓ组和ＤＭＡＲＤｓ组ＤＡＳ２８评分与血清ＴｘＢ２表达量具有明显相关性（ｐ＜０．００１，ｒ却．８９１和ｐＣＯ．ＯＯｌ，＝ｒ０．９５３），但炎症指标ＣＲＰ和ＥＳＲ均与ＴｘＢ２无明显相关性。Ａ３．基础研究ＢＭ５６７对ＲＡ滑膜细胞ＭＨ７：随着作用时间延长和药物浓度的増加，ＭＡＣＴＮ－増殖的抑制效应逐渐増强５６７１的表达。ＢＭ５６７可；Ｂ可明显抑制细胞骨架成分－－２ｍＲＮＡ的表达ＮＦｋａａＢ２的活化也同时抑制Ｃ０Ｘ蛋白和，而且对核转录调控因子ｐｐ有明显抑制作用。结论：１

7、、。．近现代医家临床治疗蒋证时善用巧风湿药补虚药Ｗ及活血化疯药其中活血９６．８％化疲药在蒋证的治疗中运用特别广泛，有的处方含有活血化疲药，提示活血化Ｉ疲药具有广泛的临床运用基础＂血疲贯穿瘦病＂，佐证本课题组的始末的病因病机认识。２．ＲＡ患者血清ＴｘＢ２表达量与疾病活动度评价指标ＤＡＳ２８具有很好的相关性，提示ＴｘＢ２可作为评价ＲＡ疾病活动度的新指标；而非ＤＭＡＲＤｓ组和ＤＭＡＲＤｓ组间ＴｘＢ２表达无差异则提示ＴｘＡ２相关通路是ＤＭＲＤｓ药物的作用盲点，对该通路的深入研究将有利于寻找治疗ＲＡ的新帮点。３．在ＲＡ滑膜细胞中存在

8、ＴｘＡ２自我激活反馈通路