同种带瓣主动脉去内皮处理的基础研究

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1、分类号:R654密级:不保密UDC:616学校代码:11065硕士学位论文同种带瓣主动脉去内皮处理的基础研究荆辉指导教师常青副主任医师学科专业名称外科学(心血管外科学)论文答辩日期2015年5月28日摘要目的比较去内皮同种带瓣主动脉与传统去细胞同种瓣的生物学特性和免疫原性,探究性能更优越的同种瓣预处理方法。方法获取家兔带瓣主动脉根部组织,随机分为新鲜组(获取后无特殊处理,作为空白对照组)、去内皮细胞组(应用胶原酶处理法脱去内皮细胞)、去全部细胞组(应用传统方法脱去组织中全部的细胞成分)。应用H&E、Masson、VG染色法及扫描电镜进行组织形态学观察,通过对比测定

2、各组组织厚度、抗张强度、断裂拉伸率及热皱缩温度进行生物学特性评价,通过CD152免疫组织化学染色观察及原子火焰吸收法测定移植物钙含量变化进行免疫原性评价。结果组织形态学观察结果提示:去内皮和去细胞处理均达到了理想的脱细胞目的。三种组织的厚度、热皱缩温度无统计学差异(P>0.05)。与新鲜组相比,去内皮细胞组抗张力性能变化不明显(P>0.05),去全部细胞组抗张性能明显下降(P<0.01)。新西兰兔皮下包埋实验后HE染色观察发现:新鲜组炎性反应最为剧烈,包埋后有大量炎细胞浸润;与新鲜组相比,去内皮细胞组包埋后炎性反应显著减弱,炎细胞数目明显减少,去全部细胞组炎性反应

3、最弱,仅组织边缘有少量炎细胞浸润。免疫组化观察发现去内皮细胞组和去全部细胞组CD152表达水平明显高于对照组(P<0.05),而去内皮细胞组与去全部细胞组之间未见显著差异(P>0.05)。钙含量分析结果提示:去内皮细胞组和去全部细胞组包埋后钙盐增加量较新鲜组显著下降(P<0.05),去内皮细胞组和去全部细胞组间未见统计学差异(P>0.05)。结论同种带瓣主动脉经去内皮和传统去细胞处理后,免疫原性均显著下降,但去内皮处理较传统去细胞处理更好地保留了同种瓣的抗张性能。硕士研究生:荆辉心血管外科学指导教师:常青(副主任医师)关键词:主动脉瓣;同种移植;去内皮;移植免疫学

4、;AbstractObjectiveTosearchforaproperdecellularizationmethodforaorticroothomograft,thealterationsofbiologicalandimmunologicalpropertiesofrabbitaorticroothomografttreatedwithde-endothelializationanddecellularizationmethodswereinvestigatedintheresearch.MethodsAorticroothomograftsobtained

5、fromrabbitswererandomlydividedintofreshgroup,de-endothelializationgroup,anddecellularizationgroup.Themorphologyofhomograftswasevaluatedbyhematoxylin-eosin,Masson,VGstainingsandscanningelectronmicroscopy.Thebiologicalpropertiessuchasthickness,tensilestrength,brokenextensionrate,andheat

6、shrinkagetemperatureweredetected.Theimmunologicalfeatures(inflammatorycellinfiltration,calciumcontentandCD152expression)weredeterminedwithimmunohistochemistryandflameatomicabsorptionspectrometry.ResultAsdemonstratedinmorphologicalobservation,de-endothelializationanddecellularizationme

7、thodsusedattainedourdesiredaimperfectly.Tensilestrengthandbrokenextensionrateofdecellularizationgroupweredecreasedsignificantlycomparedwithfreshgroup(P<0.01),whilethedifferencebetweende-endothelializationgroupandfreshgroupwasnotsignificant(P>0.05).Afterallogenictransplantation,inflamm

8、atory

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