反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌八种药物耐药性的研究

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6、核分枝杆菌八种药物耐药性的研究摘要:耐药结核病尤其是耐多药结核病（multi-drugresistanttuberculosis，MDR-TB，）及广泛耐药结核病（extensivelydrugresistanttuberculosis，XDR-TB，）的出现和流行成为了全球重点关注的公共卫生问题及社会问题。长期以来，以细菌培养为基础的传统药敏试验被视为金标准广泛应用于临床，但其耗时长，结核病患者在初期得不到及时有效的治疗而延误病情。新兴的分子生物学方法在部分一线抗结核药物中已经取得了良好的检测效果，几乎可以与表型

7、药敏试验相媲美，但它们需要特殊的仪器试剂，且在二线药物检测中应用较少。而反向斑点杂交（Reversedotblothybridization,RDBH）是一种基于基因扩增上的分子杂交技术，具有快速、简便、高效、直观等特点。本研究旨在建立一种能同时检测结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis，MTB）对四种一线和四种二线抗结核药物耐药性的RDBH技术，以实现耐药结核病的全面快速检测，为有效防治耐药结核病提供新的技术手段。分别针对结核分枝杆菌八种药物，包括四种一线抗结核药抗结核药异烟肼（Ison

8、iazid，INH）、利福平（Rifampicin，RIF）、链霉素（Streptomycin，SM）、乙胺丁醇（Ethambutol，EMB）和四种二线抗结核药氧氟沙星（Ofloxacin，OFX）、卡那霉素（Kanamycin，KAN）、阿米卡星（Amikacin，AMK）、卷曲霉素（Capreomycin，CPM），I主要耐药相关基因及常见的突变位点，