南方红豆杉悬浮细胞培养生产紫杉醇及其细胞培养物的化学成分研究

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1、暨南大学硕士学位论文南方红豆杉悬浮细胞培养生产紫杉醇及其细胞培养物的化学成分研究StudyontaxolproductionandchemicalconstituentsofTaxuschinensisvar.maireicellsuspensionculture作者姓名：白向阳指导教师姓名及学位、职称：江仁望博士/教授协助指导老师：田海妍博士/副研究员张卫教授学科、专业名称：药物化学学位类型：学术学位论文提交日期：2015年5月论文答辩日期：2015年5月31日答辩委员会主席：刘永宏教授论文评阅人：邱声祥研究员张晓琦教授学位授予单位和日期：暨南大

2、学2015年6月30日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得堅南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：自^^砑签字曰期：-〇^夕年6月aTh学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解要南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权

3、暨1南大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话:通讯地址：邮编:暨南大学硕士学位论文本论文中缩略词表缩写中文英文NAA萘乙酸Naphthylacetic6-BA6-苄氨基腺嘌呤BenzylAminopurine2，4-Dichlorophenoxyaceticacid2,4-D二氯苯氧乙酸NuclearMagneticResonanceNMR核磁共振DEPT无畸变极化转移增益Distortionless

4、EnhancementbyPolarizationTransfer1HMBC氢检测异核多键相关谱H-DetectedHeteronuclearMultiple-BondCorrelationSpectroscopy1HSQC氢检测异核单量子相关谱H-DetectedHeteronuclearSingle-QuantumCoherenceSpectroscopy11111H-HCOSYH-H同核相关谱TwoDimensionalHCorrelationSpectroscopyHR-ESI-MS高分辨电喷雾电离质谱HighResolutionElect

5、ronSprayIonizationMassESI-MS电喷雾电离质谱ElectrosprayMassSpectroscopyEI-MS电子轰击电离ElectronImpactIonizationLC-MS液相色谱-质谱联用LiquidChromatographyMassSpectrometryUV紫外光谱Ultra-Violetspectrummp熔点MeltingPointIR红外光谱Infra-RedspectrumHPLC高效液相色谱HighPerformanceLiquidChromatographyDMSO二甲基亚砜DimethylSu

6、lfoxideTLC薄层色谱ThinLayerChromatographyAc乙酰基AcetylI暨南大学硕士学位论文摘要南方红豆杉(Taxuschinensisvar.mairei)又称美丽红豆杉，是特产于我国的一个变种红豆杉，广泛分布在我国大部分地区。南方红豆杉的树皮、叶、根、枝等部位均含有紫杉醇。为了保护、合理利用已有的南方红豆杉资源，自上个世纪90年代开始，我国就对南方红豆杉开展了人工栽培、植物组织培养等研究。植物细胞培养因其繁殖速度快，培养条件易于优化，可以人工控制培养过程，实验过程不受时间、气候等因素的影响，同时提取纯化过程相对简单等优

7、点，受到了人们越来越多的关注。本论文对南方红豆杉的嫩茎进行愈伤组织的诱导，成功获得一株高产紫杉醇细胞株，并对其进行扩大培养。为了提高紫杉醇的含量，我们在愈伤组织诱导试验中对外植体进行了选择，对诱导过程中的条件进行了优化，最终选定的条件为：B5基本培养基，添加1mg/L2,4-D、0.1mg/L6-BA、100mg/LVc、0.2928g/L谷氨酰胺与15g/L蔗糖，pH调至5.8，黑暗下培养。在此条件下，紫杉醇的含量最高达到了100mg/L(鲜重)；除主要目标产物紫杉醇，我们还对细胞培养物进行了系统的化学成分研究，并运用各种色谱手段从中分离得到了1

8、5个化合物，利用MS，UV，IR，NMR，单晶X-衍射等方法鉴定了其中13个化合物的结构，包括1个新化合物，4个首次从南方