别构调节sigma-1受体在小胶质细胞介导炎症中的作用及其机制研究

《别构调节sigma-1受体在小胶质细胞介导炎症中的作用及其机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、SOOCHOWUNIVERSITY论文题目另IJ构调节sigma-l受体在小胶质细胞介导炎症中的作用及其机制研究研究生姓名伍壮指导教师姓名镇学初教授专业名称药理学研究方向神经精神药理学论文提交日期2015年5月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研宄成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研宄作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于

2、收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在____年_月解密后适用本规定。非涉密论文s/论文作者签名：-曰导师签名：曰别构调节sigma-1受体在小胶质细胞介导炎症中的作用及其机制研究中文摘要别构调节sigma-

3、1受体在小胶质细胞介导炎症中的作用及其机制研究中文摘要目的：研究sigma-1受体别构调节剂SKF83959对脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)介导的小胶质细胞炎症反应的抗炎作用以及炎症介质释放所引起的神经毒性的保护作用，并进一步探讨SKF83959抗炎作用的分子机制。方法：利用LPS刺激的BV2小胶质细胞，MTT法检测细胞活性；收集BV2细胞培养液上清，分别用Griess法和ELISA法检测一氧化氮（NO）和肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量；收集BV2细胞超声破碎后进行蛋白定量，用ELISA法检测细胞内DHEA的含量；Quantitativereal-timePCR(Q-

4、PCR)方法检测炎症介质TNF-α、IL-1β和iNOS的mRNA表达水平；WesternBlot方法检测iNOS蛋白的表达以及MAPKs和IKK/IκBα蛋白磷酸化水平；收集细胞，流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的水平；用放射性配基结合实验测定SKF83959对脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone，DHEA）与sigma-1受体结合能力的影响；BV2小胶质细胞条件培养基与HT-22海马神经元细胞共培养，收集细胞，采用流式细胞术检测神经元细胞凋亡水平，研究SKF83959对LPS介导的BV2小胶质细胞炎症介质引起的神经毒性的保护作用。结果：SKF83959显著抑制LPS

5、激活的BV2小胶质细胞炎症反应，但被sigma-1受体拮抗剂BD1047和BD1063以及DHEA合成抑制剂酮康唑阻断；SKF83959促进了DHEA与sigma-1受体结合，并以正向协同的方式增强了外源性DHEA的抗炎作用；Sigma-1受体拮抗剂BD1047和BD1063也阻断了SKF83959和DHEA的协同抗炎作用；在小胶质细胞条件培养实验中，SKF83959可以改善小胶质细胞炎症介质对HT-22神经元细胞的神经毒性；SKF83959的抗炎作用与MAPK/ERK和NFκB信号通路激活以及D1受体活化并不相关。结论：SKF83959通过别构调节sigma-1受体抑制BV2小胶质细胞的炎症

6、反应I中文摘要别构调节sigma-1受体在小胶质细胞介导炎症中的作用及其机制研究并对激活的小胶质细胞的炎症介质所引起的神经毒性具有保护作用。关键词：SKF83959；小胶质细胞；炎症反应；DHEA；sigma-1受体；别构调节作者：伍壮指导教师：镇学初教授II别构调节sigma-1受体在小胶质细胞介导炎症中的作用及其机制研究英文摘要SKF83959inhibitsmicrogliamediatedinflammationviaallostericallymodulatingsigma-1receptorsAbstractObject:Toinvestigatetheeffectsofsigma

7、-1receptorallostericmodulatorSKF83959onmicroglia-mediatedinflammatoryresponseanditsmechanism.Methods:WeemployedLPS-stimulatedBV2microgliatoexploreanti-inflammatoryeffectofSKF83959.Cellviabilitywasmeas