利用捕获测序技术筛选影响鸡血清igy含量的候选基因

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1、读赤緊、玲玲玲玲&式钱、.'旅萨1i;一皆府皆>冷苗^巧左、、'-*卢矣巧;處球香零#菩^■衣去?.'^鄭弟為.技心游过弘樂若祭安>本/^4媛巧叫乂A等手織巧:為!>二:()、它、;?三?^茜皆-^、’..-?*.YANGZHOUUN,:WIVERISTY、^、^J/^^^;壬学化(学术型)"声.麟夢?^:利片捕获細序技术筛选穀响鸡血清Y含量的候逸基因-Ig、己峡、?-、’:冷.—/聲;^——劈心續户.、点片f言..苗'’、'^’'’叫?-今.曲/:>fV

2、v诚磅一荷褒讀^-沪仁如/‘技參哭:六?225009导教师姓名陈国宏教授,扬州大学,江苏扬州,二背'?^U赵桂苹研究员-,中国农业科学院,北京,100193."、A申请学位级别:击学科专业名称:动物遗传育种与繁殖:._時每 ̄.'2015;20.论文提交H期:年5月论文答辩日期15年5月23日_____^w-J学位授予单粒扬州欠学学位授予日期;户;2015年6月30日->*''--、-:。一;郑元林教授?-.答辩委员会主席:>./每<f,.、*’七;.本地矜端:舍心^巧義^

3、%巧衣冷己,喪,馬^?策巧^方方弯结蠻兴,编凌雑鳥"".....占?之义^二^义、礙誤V蓋父知论文资助项目现代农业产业技术体系建设专项资金CARS-42)(项目EarmarkedfundforChinaAgricultureResearchSystem-Grantno.CARS42()刘满:利用巧获测序技术筛选影响鸡血清I巧含量的候选基因[利用捕获测序技术筛选影响鸡血清IgY含量的候选基因中文摘要一抗病性状的功能基因筛选和鉴患直是现代家禽育种研究的热点。前期研究中,已利

4、用60KSNPBead浊ip技术,通过全基因组关联分析(GWA巧筛选到了与鸡免疫性状相关显著关联位点及重要区域,在此基础上,对与血清免疫球蛋白YdmmunoglobulinY,IgY)含量显著相关的染色体区域进行了重测序分析。W56日齡北京油鸡(样本数728只)和白来航鸡(样本数525只)为素材,分别选择IgY含量极高和极低个体各40个,组成两品种、高低表型各4个处理组,每个处理随机等量(lOOng心L)混成分为4个重复,每个重复(池)包含10个个体。筛选分布于11,16和19H条染色体上共3.3M的候选目

5、标区域,运用捕获芯片、Solexa高通量测序等技术进行测序分析。共获得单碱基变异35154个,经注释,其中基因型为纯合的碱基变异为28862个,杂合的单碱基变异6292个CDS区的同义突变SNP1045个,得到,引起氨基酸发生变化的错义突变有2190个,位于基因上的SNP有18332个829el位点,。筛选到个Ind其中绝大部分位于mRNA区域。随机挑选四个基因乃?/M7义公巧防厶^扮PW及乂及以,运用PC民-NPSanger法进行混池测序得到24个S,包含二代测序结果中的21个SNP位点,证实捕获测序SNP结果

6、可靠。对2个Indel进行验证,其中16号染色体上公基因上的9个碱基(CCACTGCCA)的缺失是在两品种高表型组共有的Indel突变,与捕获测序结果一致。对公fV基西Indel所在的内含子5的多态性进行检测,结果表明,在进行捕获测序的北京油鸡和白来航鸡样本中,该Inde()l区域存在兰种基因型,即野生型9个碱基全部存在,AA型、突变型巧个碱基其中兰个发生突变,BB型)、缺失型(9个碱基全部缺失,CC型),但基巧型IgY均值间呈现AA<BBAA<CC的变化.,但差异并不显著(P>005),,两个品种具有相同的变化

7、趋势。在窩度选育的白来航鸡马立克氏病易感品系B19单倍型(37只)的基因型全部为AA型,抗病品系B21单倍型(34只)的基因型全部为BB型,基因型频率各为100%。MHC5/7基巧影响1类抗原分子与抗原化结合的特异性,本研究发现的9bp碱基的突变可能引起的W变剪接或者基因表达差异,继而改变鸡血清IgY抗体的生成及马立克氏病的抗病性。I//关键词:鸡Y含量公MC立克氏病;血清g;捕获测序;:马?扬州大学硕±学位论文ScreeningCandidateGenesAssociatedwithChicke

8、nSerumIYgContentbyTaretedReseencingqugAbstractThescreeningandidenti行cationoffunctional

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