几种环境雌激素与dna相互作用检测

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1、分类号：密级：UDC：学号：415614913020南昌大学专业学位研究生学位论文几种环境雌激素与DNA相互作用检测StudyontheInteractionbetweenEnvironmentalEstrogensandDNA速俊华培养单位（院、系）：食品学院指导教师姓名、职称：张国文教授指导教师姓名、职称：章新泉教授级高工专业学位种类：工程硕士专业领域名称：食品工程论文答辩円期：评阅人:年月日一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方

2、外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌人学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：如W年{月3日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入冇关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、？1:编本学位

3、论文。同时授权北京万方数据股份冇限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写hit#导师签名（手写）:z签字日期：年6月各日签字日期：^年1^/月J日论文题目破激'#、各1淑互+用▲糾姓名冰後择学号论文级别博士□硕士<院/系/所4众弇专业联系电话E_mail通信地址(邮编)：_备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，______年—月后公开)摘要

4、摘要环境雌激素(EEs，EnvironmentalEstrogens)是通过与雌激素受体相结合，来竞争受体结合位点，影响细胞信号传播途径等方式，发挥类似雌激素的效应，扰乱人和动物正常内分泌的外源性化学物质。而作为生物体遗传物质主要载体的DNA是许多小分子作用的主要靶标，小分子的参与可能会对DNA分子造成损伤，并危害到生物体的生长发育。因此，研究环境雌激素与生物大分子DNA的相互作用，为深入认识环境雌激素与DNA的作用机制及环境雌激素的危害提供理论依据。本文联合应用多种光谱学方法并结合化学计量学和分子模拟等技术，在模拟人体生理酸度(p

5、H7.4)条件下，测定了三种环境雌激素(己烯雌酚、双酚A、双酚AF)与小牛胸腺DNA的相互作用。主要内容如下：1.简要介绍DNA的生理特性和环境雌激素的主要危害，简要概述了生物分子与小分子物质相互作用的基本理论与检测方法。2.在人体生理酸度条件(pH7.4)下，以吖啶橙(AO)作为荧光探针，采取荧光光谱法、圆二色谱法(CD)和红外光谱(FT–IR)以及粘度测量手段，测定了环境雌激素己烯雌酚(DES)与小牛胸腺DNA(ctDNA)的相互作用。结果表明，DES能在A，T碱基富集区以嵌插方式与ctDNA结合，置换出之前嵌到其中的AO，结合

6、常数最大可达到104数量级，且由二者热力学中焓变熵变均小于零的数值可推测氢键和范德华力是反应中的主要驱动力，同时DES的存在还使ctDNA的相对粘度值上升，并导致DNA的B构象向A构象转变。3.在pH=7.4的Tris–HCl缓冲溶液中，通过构建化学计量学多元曲线分辨–交替最小二乘法(MCR–ALS)结合光谱测量、分子模拟及DNA熔点、粘度研究的方法体系，测定了环境雌激素双酚A(BPA)与ctDNA的结合性质。发现BPA能嵌入到ctDNA螺旋结构中，使ctDNA熔点和粘度都有一定程度的增加。测得反应的结合常数为103数量级大小，FT

7、–IR和CD分析表明，BPA主要作用于ctDNA的A、T碱基对，并导致ctDNA的B型构象向A型构象转变。分子模拟直观地展现了BPA嵌入到ctDNA双链中的空间结合模式。应用MCR–ALS分析BPA与ctDNA反应的紫外吸收光谱，得到了反应体系中各组分（BPA、I摘要ctDNA、ctDNA–BPA复合物）的浓度变化，根据浓度变化曲线可定量测定BPA–ctDNA相互作用进程。同时还发现随着β–环糊精(β–CD)的加入，BPA的荧光强度明显增强，β–CD的存在为BPA提供了一个疏水环境，并未明显影响BPA与ctDNA的结合作用。4.MC

8、R–ALS方法解析了双酚AF(BPAF)与ctDNA的反应的复杂紫外光谱数据矩阵，得到了反应组分的光谱曲线及浓度变化趋势，根据组分浓度的关系，可实现对BPAF与ctDNA相互作用过程的监测。荧光猝灭实验表明，ctDNA对BPAF的荧光