资源描述：
《人pamm蛋白的原核细胞表达、纯化及其体外抗炎作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、UDC：学号：406519612325南昌大学硕士研究生学位论文人PAMM蛋白的原核细胞表达、纯化及其体外抗炎作用研究Expression,purificationandanti-inflammatoryeffectsofhumanPAMMinvitro付志超培养单位（院、系）：南昌大学医学院指导教师姓名、职称：辛洪波教授申请学位的学科门类：理学硕士学科专业名称：生理学论文答辩日期：2014年06月08日答辩委员会主席：评阅人：2014年05月日Expression,purificationandanti-inflammatoryeffectsofhumanPAMM
2、invitroADissertationPresentedByZhichaoFuMajor:PhysiologySupervisor:ProfessorHong-BoXinSubmittedtotheGraduateSchoolofNanchangUniversityfortheDegreeofMASTEROFSCIENCEJune,2015SchoolofMedicine,NanchangUniversity,Nanchang,330088,P.R.China学位论文独创性声明一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研
3、究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本
4、学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要炎症作为一种常见的疾病严重影响着人们的身体健康。研究发现，炎症与动脉硬化、癌症、糖尿病、肥胖等有密切关系。前期相关的研究表明
5、，人PAMM蛋白在HEK293和RAW264.7细胞中的高表达可明显增加细胞内GSH/GSSG比率，保护细胞免受过氧化的损伤，提示该蛋白有抑制或减缓炎症反应的功能。为了研究PAMM对体内外各种炎性反应的影响，本研究拟构建原核表达体系实现PAMM蛋白的体外生产，验证其抗炎效果并探讨其在预防和治疗炎症性疾病的作用。我们成功地构建了pET28a-Pamm原核表达载体，并在温度为16℃，IPTG浓度为0.8mM的诱导条件下实现了PAMM在大肠杆菌Rosetta(DE3)的可溶性表达；经镍柱亲和层析纯化之后，可得到纯度大于90%的PAMM蛋白。纯化后的PAMM蛋白用于体外细胞
6、试验，结果表明该蛋白可明显抑制TNF-α、IL-1β和IL-6在转录水平的表达，并可显著减少IL-6和NO的产生。因此，实现PAMM蛋白的高效可溶性表达以及证明其在抗炎方面的显著效果将为该蛋白作为抗炎药物的开发提供可能。关键词：PAMM；原核表达体系；纯化；抗炎IIAbstractABSTRACTInflammationplaysanimportantroleinvariousdiseasessuchasatherosclerosis,heartdisease,stroke,cancer,diabetes,osteoarthritis,asthma,migraine
7、,Alzheimer'sdisease,periodontitis,irritablebowelsyndrome,chronicfatigue.Previousstudiesshowedthattheover-expressionofPAMMproteinsinHEK293cellsandRAW264.7cellssignificantlyincreasedtheGSH/GSSGratio,andprotectedcellsfromhydrogenperoxide–inducedoxidativestress,indicatingthatPAMMisapoten
