不同缺血预调适方案对大鼠肢体骨骼肌缺血再灌注损伤影响的实验研究

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1、２０１２２０２８７户＆虔种乂＃学号：＾＾ＧｕａｎｘｉＭｅｄｃａｎｖｅｒｓｇｉｌＵｉｉｔｙ硕±学位论文不同缺血预调适方案对大鼠肢体骨骼肌缺血再灌注损伤影响的实验研究劳宏业＊ｖｆ导师姓名：阳富春专业名称：创伤骨科手外科申请学位类型：学术型学位答辩委员会主席：余斌答辩委员会委员：余斌陈俊强詹新立梁浩尹东二０—五年五月原剑性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｌ义标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含获得广西医科大

2、学或其他教育化构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：＾签字日期兴ｇ年。爲１日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规：定，印在校期间论文的知识产权属广西医科大学。学校有权保存论文的电子和纸质文档，可借阅或上网公布本论文的部分或全部内容，可Ｌ乂采用影印、复印或其它手段保存、汇编本论文，学校可向国家有关机关或机构送交论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借阅。同意广西医科大学可Ｌ乂用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全

3、部或部分内容。保密论文在解密后遵守此规定。学位论文作者签幸导师签字＂签字日期：化啤化月曰签字日期月ｂ曰如炸／２０１２级广西民科大学硕±学份论义目录一、中文摘要１二４、英文摘要Ｈ、论文正文７１、前Ｓ７２、材料与方法１０３、结果１６４、附胃１６５、職２６６、结论３３７、参考文献３４四、英文缩略词对照３７五、综述及参考文献３８六、攻读学位期间发表的论文５０六、致谢５１２０１２级广西民科大学硕±学化论义不同缺血预调适方案对大鼠肢体骨骼肌缺血再灌注损伤影响的实验

4、研究摘要目的；研究３个不同缺血预调适方案对大鼠肢体骨骼肌缺血再灌注损伤模型的影响，通过对骨骼肌组织学光镜观察和超微结构观察，测定骨骼肌湿／干比值、血清乳酸脱氨酶ａ抓）和肌酸激酶（佛）活性，检测骨骼肌３坏死程度，比较种不同缺血预调适方案对肢体缺血再灌注损伤保护效果一的差异，。，从中筛选出最优方案为进步实验研究奠定基础方法，再灌法时松开动脉夹，；使用无创动脉夹夹闭大鼠右侧后肢股动脉建立肢体缺血再灌注损伤模型。健康成年雄性ＳＤ大鼠４８只，随机分为缺＝组１２）血血再灌注沮（缺血姐）、缺血预调适Ａ、Ｂ、Ｃ沮共４组（ｎ／，缺再灌注组为单纯缺血再灌注组，于夹

5、闭股动脉４小时后，恢复灌注。缺血预调适Ａ组采用夹闲股动脉２分钟，开夹２分钟，依此循环６次，再夹闭股动脉缺血４小时，后恢复灌注。缺血预调适Ｂ组采用夹闲股动脉５分钟，开夹５分钟，依此循环３次，再夹闭股动脉缺血４小时，后恢复灌注。缺１１血预调适Ｃ组采用夹闭股动脉分钟，开夹分钟，依此循环１０次，再缺血４小时。缺血组和缺血预调适姐分别于再灌注后２小时、，后恢复灌注１２小时、２４小时时间点取股静脉血和左、右后肢小腿肌组织，并处死大鼠。股静脉血离私，取血清用ＥＬＩＳＡ法测定ＬＤＨ和ＣＫ活性变化。取右后肢小腿比目鱼肌，用Ｈ＆Ｅ染色观察骨骼肌炎症、水肿和坏死等病理学改变

6、，用醋－酸轴梓樣酸铅染色，通过透射电镜观察骨骼肌超微结构改变。取左（自身空白对照）、右后肢排肠肌称取湿重，干燥后称取干重，计算湿干重比。切取右后肢胚前肌，用ＴＴＣ染色，观察肌肉颜色变化并用ＳＣＩＯＮＩＭ祀图１２０１２级广面民斜大学硕王挙仿论古像软件计算坏死面积百分比，对化各组实验结果。结果：缺血组再灌注后Ｈ个时间点（２小时、１２小时、２４小时）的ＣＫ值和ＬＤＨ值均高于预调适组（Ｐ＜０．０５）；再灌注后２小时，预调适Ａ组的ＣＫ值和ＬＤＨ值低于Ｂ、Ｃ组（Ｐ＜０．０５），预调适Ｂ沮的ＣＫ值和ＬＤＨ值低于Ｃ组。＜化０５）；再灌注后１２小时，预调适

7、Ａ组的沈值和ＬＤＨ值与Ｂ组无显著差异（Ｐ＞０．０５），预调适Ａ组的ＣＫ值和ＬＤＨ值均低于Ｃ组，再灌注２４小时，预调适Ｂ组的ＣＫ值和ＬＤＨ值均低于Ａ、Ｃ组（Ｐ＜０．０５），预调适Ａ组的ＣＫ值和ＬＤＨ值低于Ｃ姐（Ｐ＜化０５）。湿／干重比：缺血组再灌注后２４小时湿干重比值最大，预调适Ａ组再灌注后２小时比值最小，缺血组不同时间点的比值均大于预调适组（Ｐ＜０．０５），再灌注１２小时巧预调适Ａ组的比值均小于Ｂ、Ｃ组（Ｐ＜０．０５），预调适Ｂ