资源描述:
《s-烯丙基半胱氨酸对大鼠非酒精性脂肪肝的影响以及机制研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheProfessionalDegreeofMasterinScienceTheProtectionandtheMechanismofS-allylcysteineonRatwithNon-alcoholicfattyliverdiseaseMasterCandidate:YanJingtingMajor:BiologySupervisor:Prof.HuXiaminWuhanUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hub
2、ei430081,P.R.China2015.5.20摘要目的:研究大蒜中的主要成分S-烯丙基半胱氨酸(S-allylcysteine,SAC)对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD)大鼠的肝保护作用,并对其可能的作用机制进行探讨。方法:1.动物实验分组及造模:正常组(Normal)、非酒精性脂肪肝模型组(Model)、SAC低、中、高剂量组及阿伐他汀钙组(Atorvastatincalcium,ATC)。其中正常组喂养普通饲料,其余各组喂养高脂饲料。SAC低、中、高组分别每天灌胃(Intragastrical,ig)同体积不同浓
3、度的SAC,其剂量分别为25mg/kg,50mg/kg,100mg/kg。高脂饲料持续喂养12周,每天称取各组大鼠观察其体重变化以及大鼠活动情况。于第4,6,8周模型组剪尾取血检测血清中甘油三酯(Totaltriglyceride,TG)、胆固醇(Totalcholesterol,TC)、高密度脂蛋白(Highdensitylipoproteincholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白(Lowdensitylipoproteincholesterol,LDL-C),并按血脂水平、体重以及肝组织切片病理学标准筛选符合条件的脂肪肝大鼠。2.SAC体外抗氧化作用:采用DPPH、
4、ABTS、还原力、β-胡萝卜素漂白法(β-beaching)、硫氰酸铁法(Ferricthioeyanate,FTC)和硫代巴比妥酸法(Thiobarbituricacid,TBA)方法检测SAC的体外抗氧化作用。3.SAC对非酒精性脂肪肝大鼠的血脂水平影响以及体内抗氧化作用:连续ig12周后,各组大鼠心脏取血并分离血清,同时将每组大鼠肝组织匀浆,检测血清和肝脏中TG、TC、HDL-C、LDL-C、游离脂肪酸(NonesterifiedFreefattyacid,NEFA)、超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde
5、,MDA)水平、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量和谷胱甘肽过氧化酶(Glutathioneperoxidase,GSH-PX)的活性。4.SAC对非酒精性脂肪肝大鼠的肝损伤的影响:检测血清和肝组织内谷丙转氨酶(Alanineaminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(Aspartateaminotransferase,AST)水平以及肝脏组织切片HE(Hematoxylinandeosinstain)染色。同时用Westernblot法检测肝组织中凋亡相关因子Bcl-2和CleavedCaspase-3表达。I结果:1.给药连续12周后,与正常组相比,喂养
6、高脂饲料的模型组体重明显重于正常组,有显著性差异(p<0.05);与模型组相比,SAC低、中、高剂量组和ATC组均有不同程度的体重减轻,且SAC高剂量组和ATC组均有显著性差异(p<0.05)。在肝重方面,模型组肝重明显重于正常组及SAC高剂量组和ATC组。与正常组相比,模型组肝指数有显著差异(p<0.01);与模型组相比,SAC高剂量组和ATC组肝指数均有显著性差异(p<0.01);HE染色结果显示:正常组肝细胞在12周末未出现任何脂肪侵润,而模型组肝细胞出现大量的脂肪空泡,SAC低、中、高剂量组脂肪空泡相对减少,且脂质沉积的程度有一定的缓解。与模型组相比,血清和肝组织中ALT、
7、AST水平均下降且有显著性差异(p<0.05);与正常组相比,TG、TC、LDL-C显著升高,HDL-C明显降低且有明显差异(p<0.05)。与模型组相比,TG、TC、LDL-C随着SAC浓度升高而降低,而HDL-C则降低,均有显著性差异(p<0.05)。2.抗氧化实验结果显示:SAC有一定的抗氧化作用;而β-beaching、FTC和TBA法的结果显示SAC在脂质抗氧化作用方面的能力较强;体内抗氧化实验结果显示:模型组中血清和肝脏的SOD和GSH-PX的活性均低于正