nf-κb活化在900mhz微波辐射通过活性氧诱导适应性反应中的作用研究

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1、ASOOCHOWUNIVERSITY硕学位论文SB论文题目____NF-kB活化在900MHz微波辐射通过活性氯诱导适应性反应中的作用研究研究生姓名吉永新指导教师姓名曹毅专业名称卫生毒理学研究方向辐射毒理学论文提交日期2015年4月IIINF-κB活化在900MHz微波辐射通过活性氧诱导适应性反应中的作用研究中文摘要NF-κB活化在900MHz微波辐射通过活性氧诱导适应性反应中的作用研究中文摘要目的：以原代小鼠骨髓基质细胞为研究对象，建立低剂量微波辐射诱导适应性反应细胞模型，分析低剂量微波辐射与ROS产生及NF-κB活化的相关性，探

2、讨低剂量微波辐射诱导适应性反应的可能机理。方法：1.低剂量微波辐射诱导小鼠骨髓基质细胞适应性反应模型的建立制备小鼠骨髓基质细胞，随机分为6组：对照组、微波照射组（900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d）、假照射组（细胞置于微波辐照装置中，不给予微波照射）、γ射线照射组（1.5Gy60Co-γ射线照射，剂量率0.376Gy/min）、微波复合组（900MHz,120μW/cm2微波照射，4h/d，连续5d，照射结束4小时后给予1.5Gy60Co-γ射线照射）、假照射复合组（假照射结束4小时后给予1.5Gy60C

3、o-γ射线照射）。γ射线照射结束后，立即收集细胞，用碱性单细胞凝胶电泳实验和γ-H2AX焦点形成试验检测细胞DNA单、双链损伤。2.ROS在低剂量微波辐射诱导适应性反应中的作用（1）低剂量微波辐射诱导小鼠骨髓基质细胞产生ROS：制备小鼠骨髓基质细胞，随机分为6组：对照组、褪黑素组（500nM褪黑素处理细胞）、微波照射组（900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d）、假照射组（细胞置于微波辐照装置中，不给予微波照射）、褪黑素+微波组（500nM褪黑素处理细胞，4小时后给予900MHz,120μW/cm2的微波照射，

4、4h/d，连续5d）、H2O2组【培养液中1:1000（V/V）浓度加入H2O2，处理细胞20~30分钟】，处理结束后立即收集细胞，用试剂盒测定细胞内ROS水平。（2）ROS在低剂量微波辐射诱导适应性反应中的作用：制备小鼠骨髓基质细胞，随机分为6组：对照组、微波照射组（900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续III中文摘要NF-κB活化在900MHz微波辐射通过活性氧诱导适应性反应中的作用研究5d）、褪黑素+微波组（500nM褪黑素处理细胞，4小时后给予900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d

5、）、γ射线照射组（1.5Gy60Co-γ射线照射，剂量率0.376Gy/min）、微波复合组（900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d，照射结束4小时后给予1.5Gy60Co-γ射线）、褪黑素+微波+γ射线组（500nM褪黑素处理细胞，4小时后给予900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d，微波照射结束4小时后给予1.5Gy60Co-γ射线）。照射结束后，立即进行碱性单细胞凝胶电泳实验和γ-H2AX焦点形成试验，检测细胞DNA单、双链损伤。3.NF-κB活化在低剂量微波辐射诱导适应性反应中的

6、作用（1）低剂量微波辐射诱导NF-κB活化：制备小鼠骨髓基质细胞，随机分为3组：对照组、微波照射组（900MHz,120μW/cm2的微波辐照，4h/d，连续5d）、假照射组（细胞置于微波辐照装置中，不给予微波照射）。于微波照射结束后0、0.5、1、2、4、6小时收集细胞，提取细胞胞浆和胞核蛋白，用WseternBlot检测NF-κB表达水平。（2）NF-κB活化在低剂量微波辐射诱导适应性反应中的作用：制备小鼠骨髓基质细胞，随机分为6组：对照组、微波照射组（900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d）、BAY11

7、-7082+微波组（10μMBAY11-7082处理30分钟，然后给予900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d）、γ射线照射组（1.5Gy60Co-γ射线照射，剂量率0.376Gy/min）、微波复合组（900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d，照射结束4小时后给予1.5Gy60Co-γ射线）、BAY11-7082+微波+γ射线组（10μMBAY11-7082处理细胞，30分钟后给予900MHz,120μW/cm2的微波照射，4h/d，连续5d，微波照射结束4小时后给予1.5Gy60Co-

8、γ射线照射）。照射结束后立即进行碱性单细胞凝胶电泳实验和γ-H2AX焦点形成试验检测细胞DNA单、双链断裂。4.ROS在低剂量微波辐射诱导的NF-κB活化中的介导作用：制备小鼠骨髓基质细胞，随机分为3组：对照组、褪黑素+微波组（500