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时间:2019-03-15
《lpsd-gal诱导急性肝炎小鼠模型的建立及mtor信号通路的初步探索》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、京碱與跨净從硕i研究生学位论文北京协和医学院研究生院学校代码:100巧学号:S20口018012硕±学位论文LPS-/Dal诱导急性肝炎小鼠模型的建立及mTOR信g号通路的巧步探索--Est;aMishmentofmurinemodelofLPS/DgalinducedacutehepatitisandmTORsignaling所院:医学生物学研究所姓名:李晓菲指导教师;刘红旗研究员导师小组:刘建生陶玉芬学科专业:免疫学研巧方向:动物模型建立及疾病机制研究完成日期:2015年5月中国医学科学院&北京协
2、和医学院硕±研巧生毕业论文目录mm1Abstract3前言61.急性肝炎的研究现状616.1急性肝炎概述1.2急性肝炎致病机制研究进巧617.3急性肝炎动物模型的研究-2.LPS/Dgal诱导急性肝炎模型研究进展7217.LPS的建模基础2-.2Dgal的建模基础9/-2l.3基于LPSDga诱导急性肝炎的相关研究9:3.mTOR信号通路潜在的治疗範点134.研究目的及预期13一、实验材料141.实验动物1424.±要试剂13.主要仪器154.16二、实验方法1
3、71.模型制#171.1不同品系小鼠药物剂量筛选171.2不同品系小鼠性别差异对药物反应的比较1713-CR18.LPS/Dgal诱导I雌性小鼠急性肝炎的相关巧标检测14-LPS/Dl.ga处理不同时间后对ICR雌性小鼠肝脏组织的检测18-2L.PS与Dgal在该模型中的作用机制研究18-2.1LPS或Dgal单独作用效果检测18-2.2LPS预处理不同时间对D钟致敏小鼠存活率的影响19-2.3LPS后期感染对Dal致敏小鼠存活率的影响9g13.mTOR信号通路在该模型中作用的研究194.样本处理194.1存
4、活率观察194.2血清AST、ALT检现!1914.3肝脏組织病理切片制作2044-PCR.半定量RT检测巧姐织细胞因子的变化204bl.5Westernot检测蛋白表达水平234.6DNAladder检测细胞调亡情况254726.统计学分析26126.小鼠急性肝炎模型建立1.1不同品系小鼠药物剂量筛选261.2性别对实验小鼠药物敏感性的影响27I中国医学科学院&北京协和医学院硕±研究生毕业论文-1.3LP/Dal28Sg诱导ICR小鼠急性肝炎的相关指惊分析-1.4LPS/Dgal诱导ICR
5、雌性小鼠急性肝炎发生的动态分析31-2l.LPS与Dga在该疾病模型中的作用机制研究3421-.LPS或Dgal单独作用效果检测34-2LPl.2S预处理对Dga致敏小鼠存活率的影响382-40.3LPS对Dgal致敏巧的小鼠存活率的影响-3.LPS/Dgal诱导的急性肝炎中的mTOR信号通路分析400,42五、结论4546六、展望参考文献4753附S附录1.缩写词53附录2.主要溶剂的配制55-1./DLPSal方55g配2.Rapamycin配方563.10%甲醒溶液1L
6、574.IxTAE电泳缓冲液1L575.2%的琼脂糖凝胶57〇托75/〇立醇溶液571L7.BCA标准品制备578.Westernblot相关溶液制备589.DNA提取相关溶液制备61附录3.逆转录体系制备63研究生简历65致谢66II中国医学科学院&北京协和医学院硕±研究生毕业论文摘要急性肝炎作为临床上一种常见病症,其危害极其严重。然而到目前为止,其致。动物模型是研究该病的重要工具-病机制还不是很清楚。脂多糖/D氨基半乳糖胺--(Lipopolysaccharide/Dgalactosamin
7、eLPS/Dal)诱导的实验小鼠急性肝炎模型是,g目前应用比较广泛的动物模型,其能够较好地模拟病毒性肝炎等急性肝炎的致病过一-a程。对于该模型的些研究表明LPS与Dgl在体内是通过不同的机制参与急性肝一-a炎的致病过程,然而其具体机制还有待进步的研究。因此,深入研究LPS与Dgl-各自在其中发挥的作用具有重要意义。另外,研究表明LPS/Dgal致病过程主要涉及到炎症反应和细胞调亡,据报道mTOR信号
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