鸭圆环病毒在人工感染雏鸭体内的侵染分布、组织病理学观察及其致凋亡作用的研究

鸭圆环病毒在人工感染雏鸭体内的侵染分布、组织病理学观察及其致凋亡作用的研究

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1、—一A.'.’、:.VJ、’心、—一I'V'-分类号%巧-.32.N学号S20123巧1^八c\家:..、■V.‘、?:争,\V*.、?一.."一畔.,四川农业大学\X>、t—,‘.;t、\、\V、.y.今\I'、松\硕dt学位论文J■^r\x.? ̄一-鸭圆环病毒在人工感染維鸭体内的侵染分布、绝织病理学观察及其致调亡作用的研究VVV^李鹏飞‘、‘‘‘\、:?。换v■'^指导教师預仁勇教授!V-方.'■

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3、文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的,成果,除了文中特别加1^标注和致谢的地方外学位论文中不包含其他个。尽我所知人或集体己经发表或撰写过的研巧成果,也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名年备月^曰关于论文使用援巧的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定,目P:学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可W采用影印、缩印或扫描等

4、复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可w用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。?研巧生签名:省鶴节主年^月曰导师签名:抑'年/月^日四川农业大学硕±学位论文中文摘要鸭圆环病毒(Duckcircovirus,DuCV)是目前发现的最小的鸭病毒,DuCV感,V的染后可造成鸭生长迟缓体重下降等症状。迄今方止,对DuC致病机制仍不完^己组织损伤有关全清楚,并且可W引起宿主淋己细胞涧,圆环病毒感染通常与谢亡。因此,研巧鸭圆环病毒在人工感染维鸭体内的侵染分布、组织病理学观察及其致调亡作用对DuCV致病机制探讨具有十分重要的

5、科学意义。1法时巧光定量PCR检测鸭圆环病奉方法的建立及半数感染量的确定为定量检测DuCV在感染鸭体内侵染分布的研巧,根据NCBI最新公布的所有DuCV序列,比对找出保守区并设计引物,构建包含rep目的基因片段的标准质粒,uCV-rePCR方法成功建立特异、敏感的检测Dp基因的q。该建立的CR法检测鸭qP疫里默氏杆菌,对DuCV特异性反应、致病性大肠杆菌等的基因组模板均无交叉反应9xi良化并且最高检测灵敏度达.23l〇copies/冲,每个梯度之间Cq值标准偏差(犯)--01.,.,重复性良好。此外在.6030之间变异系数(CV)在0.79164之间,通过

6、制备DuCV阳性病料悬液,并对病悬液进行病毒的绝对定量,然后用不同病毒拷贝数稀释2-68-3周龄,eedMuen油法算出半数感染量为6度的病悬液人工感染维鸭根据R.57X]〇copies/mL。2.巧光定量分析鸭圆环病毒在人工感染维鸭体内的侵染分布及组织病理学观察的研巧为定量分析DuCV在人工感染维鸭体内的侵染分布及观察DuCV对组织的病理损伤,本研究通过DuCV人工感染3周龄维鸭后,对胸腺、脾脏、法氏囊、肝化、肾脏进行组织病理学观察,DuCV的PCR方法并通过已建立的检测q,定量检测病毒、脏7在屯、巧脏、脾脏、肾脏、法氏囊等1个组织器官的动态变化

7、。组织病理学检测结果显示,,人工感染DuCV后胸腺、脾脏、法氏囊、肝脏、肾脏均出现不同程度的病理损伤,主要表现为毛细血管充血、出血,炎性细胞浸润,;淋己细胞稀疏细胞间隙增宽:PCR结:巨峰细胞浸润淋巴细胞发生核浓缩、核碎裂;出现空泡变性等。q果显示,攻辜后8d在免疫器官感、消化器官、消化道、呼吸道(除肺脏W外)及其3'54'5他组织器官中均可检测到DuCV-10coies10;其中免疫器官病毒拷贝数在pcopies,3'

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