栀子果实中环 烯醚萜苷类护肝解毒功效及研究

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1、...页眉栀子果实中环烯醚萜苷类护肝解毒功效研究摘要：环烯醚萜苷类是栀子果实中的主要有效成分，随着现代医学的发展，其在护肝养肝中的功效逐渐引起人们的关注和重视。栀子是一种常用中药，是一种茜草科植物，其别名又叫做黄栀子、山栀等。栀子适应性较强，在我国很多地方都有种植，在南方主要以野生为主，大多分布在江西、湖南、浙江、福建以及四川等地。最早在《神农本草经》中就有栀子作为药用植物的记载，随后其在药学上的功效被不断补充和完善。《本草经集注》中记载“栀子性寒，味苦，归心、肝、肺、胃三焦经”，主要治疗黄疸、烦心、目赤肿痛

2、等热性症状疾病。现代对栀子化学药用的研究开始于上个世纪，从研究成果上看，现代科技已经分离鉴定出栀子中的几十种化学成分，其中有40多种化合物具有明显的化学药用特性，比如黄酮类、环烯醚菇类、有机酸酷类、d-甘露醇、幽醇类及色素等。而栀子果实中的有效成分环烯醚萜苷类物质，更是在治疗肝脏疾病方面有很好的疗效，能起到保肝利胆、清热解毒、抗菌消炎的作用。1.栀子果实中的环烯醚萜苷类有效成分栀子果实中的环烯醚萜苷类有效成分主要有：栀子苷、京尼平-1-β、龙胆双糖苷、山桅苷甲酯、鸡矢藤次苷甲酯、经异桅子苷、去乙酞基车前草酸苷

3、甲酯、桅子苷酸、山桅酯、桅子新苷、去乙酞基车前草酸等几种。2.栀子果实中的环烯醚萜苷类的鉴定2.1仪器与材料本研究中用到的仪器主要是：SB-3200超声波清洗器、Eeppendorf高速离心机、ephadexTMLH-20、HKM-电热恒温干燥箱、DZF-6020真空干燥箱、waters半制备型高效液相色谱仪、1000ul定量环、2487检测器、反相硅胶RP-18、SENCO旋转蒸发仪（1000ml/10L）、大孔吸附树脂D101、Dionex分析型高效液相色谱仪、DJ-04B中药粉碎机材料：色谱纯乙腈、分析

4、纯甲醇、分析纯乙醇、自制去离子水（Hi-tech的去离子水水机进行去离子水经过微孔滤膜）、桅子。2.2有效成分萃取用100ml50%的酒精对3000g栀子干燥粉进行萃取，回流两次，2h/次；获得的萃取液进行过滤处理，然后用离心机离心10min，3000rpm；对其进行压力释放并浓缩，进行温度为60℃的真空干燥，获得的提取粉的质量为798.99g,计算物质的得率为26.63%。....页脚...页眉2.3大孔吸附树脂的准备大孔吸附树脂顾名思义不是利用阴阳离子交换集团进行吸附，而是利用本身的大孔构造，通过这种大孔

5、有选择性的从水溶液中吸附有效物质。这种大孔物质吸附性好，比常规的交换树脂好解析，另外这种树脂的强度大，还可以重复使用，因为孔结构，其流体阻力相对的较小等。本研究利用大孔吸附树脂将环烯醚菇贰类化合物从栀子中萃取，达到初步纯化。将150g萃取物溶解在2000ml水溶剂中，充分混匀，利用1500g已经准备好的D101大孔吸附树脂进行层析，层析萃取的过程为2h，然后再用1500ml洗脱液进行洗脱，之后用有机溶剂600ml酒精进行冲洗，60℃行真空干燥乙醇洗脱后的部分，最终获得总环烯醚菇苷类物质50.48g，计算得率是

6、9.3%。2.4葡聚糖凝胶柱层析上世纪60年代发展起来的一种新型的层析技术—葡聚糖凝胶色谱技术。该技术操作没有难度，最大的优点是整个层析的过程不需要有机溶剂，利用其本身具有分子筛原理进行层信息，从而达到萃取的作用。本研究利用初步提取的环烯醚菇苷粉末3.0g,充分溶解于水，将样品加入到LH-20葡聚糖凝胶柱上柱。完成上柱后，用30%甲醇作为洗脱液进行洗脱，50ml作为一个流份，一共收集了20份。根据高效液相色谱图进行合理的整理，高效液相色谱的采用梯度洗脱，用LichrosPherC18column。高效液相色谱

7、的流动相是CH3COOH:CH3CN=0.1:100，CH3COOH:H2O=0.1:100。将20份流份分成5种粉末，具体如下：粉末1是将获得的2-4合并的流份进行干燥，最终得到的粉末，对这些粉末进行检测，发现其含有的主要是H和J，一共270mg；粉末2是将5-7合并的流份进行干燥，最终得到的粉末，对这些粉末进行物质含量检测，粉末总重687mg，B、C、D和F是其主要含有的化学物质；粉末3是将获得的8-9合并的流份进行干燥，最终得到的总重789mg粉末，对这些粉末进行检测，A是其主要含有的物质。然后利用MS

8、-HNMR和.3cNMR进行波普分析，获得的数据为桅子苷；粉末4是将流份10-11合并，然后干燥共获得112mg，经过检测分析，该粉末含有的化合物主要是G物质。粉末5是将流份1-2合并，然后干燥共获得278mg，经过检测分析，该粉末含有的化合物主要是E物质和I物质2.5反相硅胶柱层析用10%乙腈溶解经过大孔树脂提取，葡聚糖凝胶柱层析获得的粉末2，乙腈-粉末2溶液在离心机进行高速离心，离心10min.